Care sunt normele pentru cuantificarea hepatitei C?

Share Tweet Pin it

Virusul hepatitei C este capabil să se înmulțească în celulele sanguine și să provoace boli limfoproliferative. Datorită mutațiilor multiple, apărarea imunității organismului slăbește și apar genotipurile și subtipurile virusului. Cu determinarea corectă și în timp util a unui anumit tip, eficacitatea terapiei antivirale depinde. Pericolul infecției este că boala este asimptomatică. Doar 15% din 100 pot experimenta greață și vărsături, pierdere în greutate și febră.

Definiția virusului hepatitei C

Rata standard a hepatitei C este în dimensiuni de la 40 la 60 nm, cu cele mai multe lipide, leziuni hepatice care rezultă dintr-un curs acut sau cronologic al bolii. Hepatita C, și anume virusul ARN din familia Togaviridae, este extrem de rezistent, este transmis prin transfuzii de sânge sau prin utilizarea obiectelor nesterile, provizii de igienă necorespunzătoare etc. Analiza cantitativă vă permite să examinați sângele și să identificați structura genetică a virusului infectat.

Pentru a determina hepatita C și genotipurile sale, este efectuată analiza cantitativă. În funcție de analizor, se pot determina trei niveluri de incidență a virusului ARN.

Subtipurile pot produce diferite modificări, astfel încât specificitatea și sensibilitatea analizorului trebuie să fie de o sută la sută. În plus față de detectarea bolii la un pacient, este necesar să se determine gradul de gravitate. Unele laboratoare nu au toate datele despre decodificarea virusului ARN, există posibilitatea unui răspuns fals pozitiv.

Cercetările privind hepatita C vor fi mai precise atunci când se studiază acești indicatori:

Luând în considerare rezultatele acestor indicatori și starea generală a corpului, se afișează un rezultat care arată gradul de infecție, forma și numărul celulelor hepatitei C din sânge. Acest lucru contribuie la procesul de vindecare și la eficacitatea terapiei antivirale.

Tipuri de analize pentru hepatita C

O reacție în lanț multidimensională (PCR) oferă o idee despre cantitatea de particule ADN în analizele efectuate de pacient și va identifica în mod corect agentul infecțios.

Este posibil să apară agenți cauzatori ai bolilor infecțioase. O infecție a ficatului, cum ar fi hepatita C, este tratabilă în timpul nostru când este detectată în timp util. Dacă este suspectat un virus, se efectuează o analiză PCR.

Având în vedere că pentru o lungă perioadă de timp simptomele virusului pot fi mascate, o persoană poate să nu simtă debutul bolii. Dar, cu o examinare aprofundată în 60-70% dintre cazuri, se detectează hepatita C, prima analiză, care este ELISA, urmată de diagnosticul PCR. Analiza se efectuează în anumite perioade pentru a determina stadiul bolii și pentru a prescrie tratamentul adecvat. Pentru a face fără ea, fără a aplica toate aceste proceduri, este posibil, fiind vaccinat împotriva hepatitei.

Analiza calitativă și cantitativă

Există analize calitative și cantitative. Esența primei este că determină prezența infecției în sânge. Și asta înseamnă că virusul infectează celulele hepatice sănătoase. Când se găsesc anticorpi la hepatita C la un pacient, se efectuează imediat un test calitativ. Rata pe care rezultatul ar trebui să o dea este "nu este detectată în sânge". La determinarea concentrației unui virus, este nevoie să cunoaștem sensibilitatea sistemului de diagnosticare, deoarece persoanele care suferă o terapie antivirală pot face analiza. Gradul de sensibilitate al analizorului nu trebuie să fie mai mic de 50 UI / ml.

Când se detectează un virus, se face o analiză cantitativă, cu alte cuvinte, încărcarea virală, care determină concentrația virusului în sânge și severitatea bolii.

Viral ARN, care este într-o anumită cantitate de sânge, este definită ca normă la o rată de 1 ml la 1 centimetru cub. După cuantificarea încărcăturii virale, este posibil să se judece gradul de infectare a mediului încă neinfectat. De îndată ce concentrația de hepatită C crește în sânge, este necesar să se izoleze din mediul înconjurător.

Este important, în primele etape, să se detecteze gradul de concentrare a hepatitei, pentru a determina ritmul reabilitării. Dacă rata hepatitei C este depășită cu mai mult de 800 mii UI / ml, este considerată prea ridicată, cu o creștere de până la un milion - critică. Dacă intervalul cantitativ este mai mic de 400 mii UI / ml, se consideră că infecția celor din jur va fi mai puțin probabilă. Această cifră arată clar că hepatita C este prezentă în organism în doze foarte mici. Analiza nu a putut determina valoarea cantitativă a particulelor de ARN ale virusului, deci este reînnoită de mai multe ori pentru corectitudinea diagnosticului.

Rezultatele analizei cantitative

Sarcina de a determina cantitatea de încărcătură virală în sângele unui pacient este identificarea gradului de infectare cu alții.

Rezultatele analizei PCR:

  1. Un răspuns pozitiv înseamnă că există o infecție în materialul biologic. Analiza permite determinarea numărului exact al celulelor infectate.
  2. Răspunsul negativ indică absența infecției, care este căutată cu atenție în organism.

Metoda de determinare cantitativă a hepatitei C este precisă și informativă, efectuată pe echipamente cu sensibilitate ridicată. Decipherarea rezultatelor analizei vă permite să aflați dacă infecția și specificul acesteia, pentru a vedea cel mai mic număr de celule infectate pe analizoare foarte sensibile.

Rezultatele fals-pozitive sau opuse sunt rareori date de analiză, mai des întâlnite în studiile imunologice.

Analiza cantitativă a PCR pentru hepatita C

Există multe subtipuri de VHC, motiv pentru care nu este întotdeauna posibilă selectarea medicamentelor antivirale eficiente și obținerea rezultatelor dorite în tratament. O varietate de agenți patogeni datorită capacității lor de a-și schimba structura, adică de a muta. Ca rezultat, imunitatea nu are timp pentru a forma un răspuns puternic împotriva agentului patogen, iar medicamentele sunt ineficiente.

Hepatita este adesea diagnosticată în stadiul de ciroză, care predispune detectarea târzie a bolii din cauza absenței semnelor clinice. Numai prin cercetări de laborator se poate detecta VHC în perioada de incubație.

O analiză cantitativă a hepatitei C face posibilă nu numai stabilirea prezenței agentului patogen în sânge, ci și calcularea concentrației acestuia.

Recomandări pentru pregătirea analizei

Nu este necesară pregătirea specifică pentru diagnosticul de laborator. Este suficient să respectați următoarele recomandări:

  1. analiza cantitativă se face pe stomacul gol, ultima masă - cu 8 ore înainte de colectarea sângelui;
  2. timp de două zile ar trebui să renunți la alcool și la vasele "grele";
  3. De o importanță deosebită sunt medicamentele pe care pacientul le ia. Ele pot afecta rezultatul studiului, astfel încât medicul ar trebui să știe despre ele.

De asemenea, nu este de dorit exercițiile grele și procedurile fizioterapeutice în ajunul prelevării de probe de sânge. Pentru a descifra analiza cantitativă a hepatitei C sa dovedit a fi fiabilă, nu neglijați recomandările de mai sus.

Adesea, pacientul primește rezultatul analizei într-o zi. Prețul studiului pentru a determina concentrația agentului patogen în sânge depinde de laborator și de calitatea reactivilor și poate ajunge la 4 mii de ruble.

Diagnosticul de laborator al hepatitei C

Printre metodele primare de diagnostic se numără testul ELISA sau testul imunosorbant legat de enzimă. Este prescris pentru detectarea anticorpilor specifici la HCV. Eficiența acestuia atinge 95%. Dacă transcrierea studiului dă un rezultat pozitiv, merită suspectată prezența agentului patogen în sânge.

Rețineți că la jumătate dintre subiecții care au efectuat un test "+" în cursul unui diagnostic ulterior, agentul viral nu a fost detectat în sânge. În acest caz, ELISA indică un contact amânat cu VHC în trecut, după cum reiese din anticorpii circulanți.

Un studiu mai precis este reacția în lanț a polimerazei sau altfel PCR. Acesta vă permite să determinați concentrația de agent patogen în sânge. Găsind un set genetic al virusului în materialul biologic, medicul confirmă hepatita C.

PCR este atribuit pacientului pentru a verifica diagnosticul. Aceasta face posibilă identificarea ARN în stadiul în care anticorpii nu sunt încă disponibili. Există mai multe tipuri de studii genetice:

  1. analiza cantitativă a PCR pentru hepatita C, care nu numai că stabilește prezența agentului patogen în sânge, dar oferă și informații despre concentrația acestuia;
  2. calitate - confirmă infecția;
  3. genotiparea - vă permite să determinați genotipul agentului patogen și să selectați cele mai eficiente medicamente împotriva acestuia.

Reacția în lanț a polimerazei

După cum sa menționat deja, există mai multe tipuri de teste de laborator:

  • analiza calitativă indică prezența unui agent patogen în sânge. Acest tip de diagnostic are un anumit "nivel de răspuns", prin urmare nu este întotdeauna fiabil. Pentru a descifra corect rezultatele și pentru a obține indicatori reali, se recomandă utilizarea unui sistem de testare cu o sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml pentru cercetare. Rata de analiză este "răspuns negativ" sau "virusul nu este detectat". Aceasta indică absența unui set genetic al agentului patogen în materialul de testare. Dacă rezultatul este pozitiv, este necesară o examinare suplimentară a pacientului;
  • Analiza cantitativă a PCR pentru hepatita C determină încărcarea virală, adică concentrația agentului patogen în sânge. Rezultatul studiului arată numărul de unități de ARN într-un volum fix de lichid biologic;

Sarcina virală este numărarea ARN infecțios într-un mililitru de sânge investigat. Unitățile de măsură sunt UI / ml, totuși unele laboratoare definesc "copii / ml", în timp ce indică semnalul de analiză standard pentru compararea și evaluarea rezultatelor.

  • genotipare. Datorită capacității agentului patogen de a schimba alegerea medicamentelor antivirale eficiente pentru terapie ar trebui să se bazeze pe genotipul său. Nu numai rezultatul, dar și durata cursului de tratament depinde de acesta. Astfel, hepatita VHC 1 necesită numirea medicamentelor pe un an, însă o tendință pozitivă este observată doar în 60% din cazuri. În ceea ce privește al doilea și al treilea genotip, acestea sunt mai puțin rezistente la acțiunea medicamentelor antivirale, din cauza cărora eficacitatea terapiei depășește 85%. La primirea unui astfel de rezultat al studiului - "virusul nu este tastat", merită suspectat prezența agentului patogen, care nu este recunoscut de sistemele standard de testare.

Indicații pentru analiză

Decodificarea analizei cantitative a hepatitei C este necesară pentru:

  1. examinarea ulterioară a pacientului atunci când au fost detectate anticorpi împotriva VHC în timpul testului ELISA;
  2. confirmarea diagnosticului;
  3. stabilirea sarcinii virale în timpul infecției mixte, atunci când o persoană este infectată cu mai multe tipuri de agent patogen;
  4. determinarea tacticii de tratament (alegerea medicamentelor antivirale, înlocuirea acestora sau terminarea terapiei);
  5. evaluarea dinamicii progresiei bolii, precum și eficacitatea drogurilor;
  6. determină stadiul patologiei (acute, cronice).

PCR are următoarele avantaje:

  1. o bună sensibilitate, ceea ce face posibilă calcularea chiar a unei cantități mici de virus;
  2. identificarea agentului patogen (ARN), și nu a antigenilor;
  3. specificitatea tehnicii - stabilirea unui anumit tip de agent patogen;
  4. viteza de obținere a rezultatelor, deoarece analiza nu necesită cultivarea culturilor într-un mediu nutritiv. Răspunsul este gata în 5 ore;
  5. universalitate - vă permite să identificați setul genetic de agenți patogeni diferiți, atât ARN cât și ADN-ului (hepatita B);
  6. detectarea infecției latente.

Cercetările de laborator ajută la confirmarea diagnosticului și fac parte integrantă dintr-o examinare cuprinzătoare (analiza simptomelor clinice, rezultate ale testului ELISA și biochimie).

În plus, PCR este utilizat pe scară largă în alergologie, genetică și, de asemenea, pentru a stabili faptul de paternitate.

Decodificarea analizei cantitative a virusului hepatitei C

Evaluarea rezultatelor diagnosticului de laborator este efectuată de un medic prin compararea datelor obținute cu norma.

Depistarea analizei pentru hepatita C

Bolile hepatice în lumea modernă sunt foarte relevante, deoarece acest organ este supus influenței negative din mediul înconjurător, al stilului de viață necorespunzător etc.

Dar există boli pe care absolut toată lumea le pot infecta și este extrem de dificil de prevăzut dacă acest lucru se va întâmpla sau nu. Aceasta, de exemplu, hepatita virală, care este transmisă în principal prin sânge și, inițial, nu se face cunoscută. În special, vorbim despre hepatita C.

Faptul că inițial virusul nu prezintă semne particulare complică grav diagnosticul, dar, totuși, există studii destul de eficiente și diverse care vor ajuta la identificarea problemei.

Principiul de bază al detectării bolii VHC este descifrarea testelor pentru hepatita C, adică compararea anumitor indicatori cu normele.

Condiții pentru obținerea indicațiilor

Diagnosticul hepatitei C este efectuat de oameni din diferite motive, în principal:

  • posibile hepatite posibile;
  • o persoană este în pericol;
  • diagnosticul este necesar în funcție de specificul lucrării;
  • femeile în timpul sarcinii sau în timpul planificării.

Există mai multe tipuri de diagnostice: unele dintre ele sunt studii superficiale, altele sunt profunde și foarte precise, principiul căruia este studiul abaterilor minime ale indicatorilor normali sau al detectării anumitor substanțe.

Pentru detectarea virusului hepatitei C în sânge uman, se folosesc 3 tipuri de metode de diagnostic, acestea fiind:

  1. Enzimă legată de testul imunosorbant (ELISA). Realizat în laborator, principiul constă în determinarea anticorpilor la hepatită, în special: IgG, IgM. Acest diagnostic nu va da un răspuns detaliat: o persoană este bolnavă sau nu, deoarece o treime din purtătorii anticorpilor nu sunt detectați. Acest lucru se întâmplă din cauza decalajului dintre intrarea virusului în organism și producția de anticorpi la acesta, deci aceasta este o analiză dubioasă și foarte superficială.
  2. Analiză imunoblotă recombinantă. Se efectuează numai pentru a confirma testele de laborator, dacă rezultatul este pozitiv, înseamnă că persoana este sau a fost un purtător al bolii. Anticorpii la virus nu sunt afișați imediat, chiar și după tratamentul cu succes al hepatitei. În plus, un rezultat fals este posibil datorită unor factori terți.
  3. Analiza de polimerază (PCR). Care este metoda cea mai exactă pentru determinarea hepatitei? - PCR unic. Este cel mai tânăr și mai precis mod de diagnosticare. Ea PCR poate da un răspuns detaliat despre cursul bolii, vă permite să setați concentrația virusului în sânge și genotipul său (există 6). Principiul se bazează pe detectarea virusului DNR / ARN în plasma sanguină. Această metodă ocolește toate cele de mai sus în ceea ce privește calitatea diagnosticului: cel puțin 20 de zile ar trebui să treacă înainte de manifestarea clinică a hepatitei și maximum 120 de zile înainte de producerea anticorpilor la 10-12 săptămâni de la intrarea virusului. Dar detectarea agentului cauzal în sânge nu poate fi în nici un fel falsă, singura restricție: trebuie să treacă 5 zile din momentul infectării, deoarece nu poate exista un virus în volumul de sânge testat.

PCR este efectuat pentru diagnosticare precisă, se întâmplă trei subspecii:

  1. Analiza calitativă. Cu aceasta, numai prezența virusului este determinată.
  2. Diagnosticare cantitativă. Folosit pentru a determina conținutul exact al virusului în volumul sanguin; în timpul tratamentului este folosit pentru a testa eficacitatea.
  3. Diagnosticul genotipic. Folosit pentru a determina genotipul, și mai târziu fenotipul virusului. Pentru a cunoaște genotipul agentului patogen este extrem de important pentru terapie, deoarece, în funcție de caracteristici, cursul și concentrația de aport de droguri se schimbă.

Analize auxiliare

În metodele de diagnostic, un rol important îl au testele suplimentare, care, uneori, schimbă complet caracteristicile tratamentului și uneori chiar indică un diagnostic diferit.

Analiza biochimică

Pentru a prescrie tratamentul adecvat și pentru a nu exacerba imaginea, trebuie să determinați în mod fiabil gradul de afectare a ficatului, pentru aceasta utilizați un test de sânge biochimic, care va arăta abateri de la norma în compoziția sa.

Modificările caracterizează caracteristicile afectării țesutului hepatic, acesta este: stadiul bolii, severitatea fibrozei, disfuncția ficatului. Metoda biochimică va arăta în sânge numărul real de bilirubină, proteine, uree, creatinină, zahăr, AST și ALT, fosfatoza alcalină, fier și gama-glutamiltranspeptidază. În plus, profilul lipidic și calitatea metabolismului proteinelor vor fi determinate.

diagnosticul fibroză

Fibroza este o deteriorare a țesuturilor hepatice, cursul depinde de gradul său, prin urmare, diagnosticul severității afectării țesutului este foarte important. Judecând după imaginea cursului bolii, medicul poate judeca urgența tratamentului: dacă situația este necritică, poate fi chiar amânată pentru a nu face rău altor organe cu medicamentele.

Alte analize

Uneori, pentru a obține o imagine completă a bolii, se utilizează o scanare cu ultrasunete a cavității abdominale și a glandei tiroide, un număr întreg de sânge. Persoanele în vârstă sunt diagnosticate cu sistemele cardiovasculare și digestive, plămânii.

Dacă nu este posibil să se efectueze analize standard ELISA / PCR, se efectuează analize specifice: analiza saliva și a altor lichide pentru prezența agentului patogen.

Indicatorii

Tehnologiile pentru diagnosticarea hepatitei C sunt la un nivel ridicat și, adesea, nu dau rezultate false.

În ciuda acestui fapt, este imposibil să se ofere o garanție de 100% a preciziei: sunt posibile rezultate fals pozitive.

Un test de sânge poate da un răspuns incorect în caz de nerespectare a regulilor de analiză sau pentru alți factori. Principalele motive pentru denaturarea rezultatelor:

  • unele infecții specifice care reacționează cu agenți de screening și testul este pozitiv;
  • sarcina de cercetare;
  • prezența substanțelor secundare în organism;
  • perturbarea sistemului imunitar;
  • încălcarea regulilor de prelevare a probelor de sânge.

Depistarea testelor pentru hepatita C

Depistarea testelor pentru hepatită se adresează unui specialist cu experiență care va determina anomalii ale fiecăruia dintre indicatori și va scrie o concluzie privind probabilitatea hepatitei.

La diagnosticarea prin ELISA, detectarea anticorpilor din sânge va indica fără îndoială că există sau a fost virusul hepatitei în corpul uman: fie că pacientul este bolnav acum, fie că a suferit boala și că antigele pur și simplu nu au avut timp să iasă din corp. Trebuie avut în vedere faptul că anticorpii nu funcționează imediat - trebuie să treacă un anumit timp pentru ca o astfel de analiză să dea rezultate fiabile, prin urmare, dacă este necesar, trebuie să redați sânge pentru testare.

Dacă diagnosticul de PCR a dat un răspuns pozitiv, atunci cu o probabilitate de 99% în organism este patogenul. În acest caz, este necesar să se determine gravitatea și să se realizeze genotiparea RNA pentru corectarea cursului și apoi să se înceapă imediat tratamentul, astfel încât hepatita să nu devină cronică. Aceste teste de polimerază sunt considerate foarte precise, deoarece pot detecta până la 1 reprezentant al virusului în celulă. Dacă rata de reacție în lanț a polimerazei nu este încălcată, atunci răspunsul este negativ și nu este nevoie să vă faceți griji.

La stabilirea hepatitei C, se utilizează determinări cantitative ale bilirubinei, ALT și AST, proteine. Conținutul acestora indică, de asemenea, gradul și severitatea bolii.

Tabelul general al indicatorilor de substanțe din sânge, care pot indica hepatita C după analiza biochimică:

Hepatita C. Analiza cantitativă. Normă, rezultatele transcrierii

Hepatita C. Ce este periculos pentru oameni? Cum să diagnosticați o infecție. Ce este necesar pentru analiză

Virusul hepatitei C. Cât de periculos este. Cum să îl identificați în timp.

Virusul hepatitei C sau VHC este o boală infecțioasă care poartă o moleculă de acid ribonucleic.

Acest tip de virus se poate adapta cu ușurință la condițiile de habitat și este adesea transformat în diferite forme ale bolii, de aceea sistemul nostru de apărare a corpului este atât de dificil de rezolvat. Șase tipuri genetice majore de infecție și zeci de subtipuri sunt clasificate. În regiunea noastră, primele trei tipuri de virusuri sunt adesea găsite.

Potrivit statisticilor, doar un sfert din cazurile de boală VHC apar fără complicații, în toate celelalte cazuri, normă, dacă infecția se dezvoltă într-un proces cronic care afectează în mod negativ organele interne. Astfel, hepatita poate fi complicată de fibroza hepatică - procesul de înlocuire a celulelor hepatice. Alte complicații se dezvoltă în funcție de reacția în lanț: ca urmare a fibrozei, apar tumori canceroase, iar boala hepatică se dezvoltă în ciroză.

În majoritatea cazurilor, infecția intră în corpul uman prin vasele de sânge. Virusul hepatitei C este diagnosticat prin mai multe metode. Monitorizați nivelul de concentrație a anticorpilor la VHC. Infecția nu a apărut dacă nu s-au găsit anticorpi în sângele pacientului. În caz contrar, virusul este studiat mai profund, efectuând un alt test - PCR. Numai această metodă permite identificarea ARN-ului virusului la numai o săptămână și jumătate după infectare, într-un moment în care organismul nu are timp să producă anticorpi la infecție și consecințele infecției nu sunt reflectate în nici un fel asupra stării generale, în special în rezultatele altor studii, cum ar fi BAC și biopsia.

Analiza PCR pentru ARN: cantitativ și calitativ. Rezultatele de decodare

Sarcina virală sau analiza cantitativă a PCR - o analiză pentru a determina nivelul de infecție în plasmă. În esență, analiza cantitativă este numărul moleculelor de acid ribonucleic infecțioase într-un mililitru de sânge.

R-ADN este o metodă cantitativă rapidă, ieftină și nu cea mai exactă pentru determinarea unui virus bazat pe detectarea celulelor cu celule ramificate. Acest test poate să nu identifice infecțiile care sunt prezente în organism din cauza sensibilității slabe - aproximativ 450 UI / ml.

Metoda cantitativă de amplificare transcripțională vă permite să găsiți celule în corpul ARN. Această metodă a apărut relativ recent, este ieftină și este un instrument de diagnostic destul de eficient. Sensibilitatea testului este de aproximativ 10 UI / ml.

Să încercăm să explicăm rezultatele analizelor. Mai jos este o masă și o decodare.

Studiu PCR pentru hepatita C: tipuri, indicații, transcript

Virusul hepatitic C este o boală gravă care apare cu afectarea ficatului. La optzeci la suta dintre pacienti, devine cronica. Virusul se înmulțește în celulele hepatice - hepatocite - și provoacă moartea lor. Țesutul moale este înlocuit cu focare de țesut conjunctiv, se dezvoltă fibroza.

Pe măsură ce se dezvoltă fibroza, ficatul nu este în măsură să-și îndeplinească funcțiile, începe ciroza hepatică, periculoasă datorită complicațiilor sale: presiune crescută în sistemul venoasei portal, sângerare gastrointestinală, coagulare sanguină afectată, modificări psihice datorate leziunilor nucleului creierului.

Cauza bolii este infecția cu un virus din familia Flaviviridae, care aparține tipului de virusuri ARN. Aceasta înseamnă că materialul genetic prin care se sintetizează proteinele agentului patogen este codificat în molecula de acid ribonucleic. Infecția are loc prin sânge, sexual, și de la o femeie însărcinată la făt. Din păcate, o perioadă suficient de mare de timp poate trece între infecție și începerea producției de anticorpi - de la două săptămâni la șase luni. Acest lucru nu permite determinarea infecției prin metoda imunotestei și începerea tratamentului în stadiile incipiente.

Ce este analiza PCR?

PCR este o metodă de analiză moleculară care permite detectarea materialului genetic al agentului patogen deja în prima săptămână după infecție utilizând reacția în lanț a polimerazei. Studiul are o specificitate ridicată, precizie și permite nu numai determinarea prezenței sau absenței virusului, ci și concentrarea și genotipul acestuia.

Pentru acest studiu, este luată sângele unui pacient în care ar putea fi localizat ARN-ul virusului. Primerii se adaugă la regiunile sintetizate artificial din sânge ale genei dorite de lungime mică, iar ARN polimeraza este o enzimă specială care crește în mod repetat cantitatea de material genetic al agentului patogen. Folosind un aparat special, se efectuează mai multe cicluri de încălzire și răcire. Apoi, materialul este analizat și comparat cu genele cunoscute ale virusului, pe baza cărora se face o concluzie cu privire la prezența sau absența infecției.

Tipuri de analize PCR pentru hepatita C

Există trei tipuri de analize PCR:

  1. Analiza calitativă a PCR. Prima etapă a studiului. Vă permite să identificați materialul genetic al virusului în sânge.

  • Analiza cantitativă a PCR. Vă permite să determinați încărcarea virală - concentrația materialului genetic al agentului patogen într-un mililitru de sânge. Acest studiu este efectuat înainte de începerea tratamentului și apoi în primul, al patrulea, al doisprezecelea, și (în cazul în care cursul este lung) de douăzeci și patrulea săptămână de tratament pentru a evalua eficacitatea acestuia.

  • Genotipare. Agentul cauzal al hepatitei C se mută frecvent și rapid. Au existat șapte variante ale acestui genotip de virus găsite pe planetă. În Rusia, primul, al doilea și al treilea tip sunt comune. Fiecare dintre genotipuri are o rezistență diferită față de terapie, de exemplu, eficacitatea tratamentului primului tip este de șaizeci la sută, iar pentru a doua și a treia această cifră atinge optzeci și cinci. Prin urmare, pentru a selecta medicamentele adecvate și pentru a prescrie un curs de tratament cu o durată suficientă, este necesar să se determine exact tipul de virus cu care este infectat pacientul.
  • Indicatii pentru analiza PCR pentru hepatita C

    Studiul PCR este prescris în următoarele cazuri:

    • contactul cu o persoană bolnavă la care s-ar putea produce infecția;
    • testul imunologic enzimatic pozitiv;
    • semne de ciroză: modificări ale mărimii ficatului, lărgirea splinei, apariția pe abdomen a plexului venoascular subcutanat;
    • apariția simptomelor de leziuni hepatice: dureri în abdomenul drept, îngălbenirea pielii;
    • creșterea activității ALT și AST în analiza biochimică a sângelui;
    • înainte de începerea tratamentului pentru a determina încărcătura virală;
    • pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antivirale;
    • după tratament pentru a controla recaderea;
    • în prezența hepatitei B diagnosticate, pentru a exclude leziunile hepatice mixte.

    Explicarea studiilor PCR privind hepatita C

    Decodificarea analizei PCR și imunotestei enzimatice pentru hepatita C trebuie efectuată de către un specialist hepatolog sau bolnav infecțios. Analiza rezultatelor PCR este necesară în combinație cu datele analizei biochimice a sângelui, biopsiei și ultrasunetelor. Numai un medic calificat va putea analiza rezultatele cercetării și, pe baza acestora, va prescrie tratamentul corect.

    Analiza calitativă de decodificare.

    În materialul biologic analizat a fost găsit materialul genetic al agentului patogen. Infecția confirmată.

    Infecția lipsește sau cantitatea de ARN a agentului patogen este sub limita de sensibilitate.

    Decodificarea analizei cantitative.

    Rata normală pentru persoanele sănătoase. Aceasta înseamnă că nu există ARN de hepatită C în materialul studiat, sau concentrația sa este sub pragul de sensibilitate al studiului.

    Concentrația ARN este sub intervalul de cuantificare. Aceste rezultate sunt interpretate foarte atent, corelându-le cu date din alte studii, adesea re-studiate.

    Nivelul încărcăturii virale la o concentrație dată este considerat scăzut. De obicei, o scădere a cantității de virus înseamnă că terapia are succes.

    Mai mult de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

    Nivelul încărcăturii virale la o anumită concentrație este considerat ridicat.

    Mai mult de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

    Cantitatea de ARN este peste limita superioară a intervalului de cuantificare. Este imposibil să se tragă concluzii cu privire la gradul de încărcare virală cu acest rezultat. De obicei, în astfel de cazuri, testul se repetă cu diluarea unei probe de sânge.

    Decodificarea genotipării.

    Detectarea ARN a unui anumit genotip

    Virusul hepatitei C cu un anumit genotip și subtip a fost detectat în biomaterial. Rezultatul este codificat în cifre romane și litere latine, de exemplu - 1a, 2b. În total, există șapte genotipuri și șaizeci și șapte subtipuri, cu toate acestea, în Rusia există doar trei primele tipuri.

    Virusul hepatitei C a fost detectat

    ARN sa găsit în sângele unui genotip rar pentru Rusia, care nu poate fi atribuit primului, celui de-al doilea sau celui de-al treilea tip. Sunt necesare mai multe cercetări.

    Acest rezultat indică faptul că pacientul este sănătos sau că cantitatea de ARN patogen este prea mică.

    Este posibil ca analiza PCR pentru hepatita C să fie negativă, iar testul imunosorbant legat de enzimă să recunoască anticorpii împotriva virusului. Aceasta înseamnă că pacientul a avut hepatită C acută și sa recuperat singur. Aproximativ douăzeci de cazuri de infecție au ca rezultat recuperarea spontană dacă corpul pacientului are o rezistență suficientă la infecție.

    Deși PCR este un test foarte precis, rezultatele acestuia pot fi distorsionate în următoarele situații:

    • sângele a fost transportat în laborator în condiții inadecvate, temperatura a fost încălcată;
    • proba de biomaterial a fost contaminată;
    • au existat urme reziduale de heparină și alte anticoagulante în sânge;
    • Investigatorii s-au dovedit a fi inhibitori - substanțe care încetinesc sau opresc reacția în lanț a polimerazei.

    Avantajele PCR față de alte metode

    1. Diagnosticarea în primele etape. PCR detectează materialul genetic al agentului cauzal. Folosind analiza imunofluorescenței se pot determina numai imunoglobuline - substanțe pe care organismul le produce ca răspuns la o infecție. În cazul unei infecții cu hepatită C, intervalul dintre infecție și debutul răspunsului imun pot fi mai multe săptămâni și luni, în acest moment ELISA va fi ineficient. PCR va da un răspuns în prima săptămână după infecție.

  • Scăderea probabilității de eroare. În materialul studiat se determină suprafața materialului genetic, care este caracteristică numai pentru un singur tip de agenți patogeni. Aceasta elimină rezultatele false. Când erorile ELISA sunt posibile, deoarece același tip de anticorpi poate fi eliberat împotriva diferitelor virusuri - astfel de anticorpi sunt numiți anticorpi încrucișați.

  • Sensibilitate ridicată. PCR permite detectarea ARN-ului agentului cauzal chiar și în cantități minime. Acest lucru face posibilă identificarea infecțiilor ascunse.
  • Cum să vă pregătiți pentru donarea de sânge pentru studii PCR

    Pentru analiza PCR a hepatitei C, se colectează sânge venos. De obicei, două porțiuni de sânge sunt luate din vena pacientului la un moment dat: primul este trimis pentru PCR, iar cel de-al doilea prin ELISA. Acest lucru se face pentru a evalua cu mai multă precizie cât de mult este infectat un pacient cu un virus și cum se confruntă cu imunitatea împotriva acestuia.

    De obicei, pacientul trebuie să respecte următoarele reguli:

    • un test de sânge este luat dimineața;
    • Intervalul dintre ultima masă și donarea de sânge trebuie să fie de opt până la zece ore;
    • cu două sau trei zile înainte de analiză, este necesar să se abandoneze alimentele prăjite și grase și alcoolul;
    • timp de douăzeci și patru de ore înainte de analiză, pacientul trebuie să evite efortul fizic: nu purtați greutăți, nu mergeți la sală de gimnastică sau la piscină.

    Ce arată o analiză cantitativă a hepatitei C?

    Este destul de dificil să se diagnosticheze bolile hepatice prin semne sau dureri externe.

    Acest lucru se datorează particularității organului, care practic nu are terminații nervoase și este un pacient cu diferite afecțiuni.

    Acest lucru se întâmplă și în cazul hepatitei - în stadiile inițiale în care acestea nu se emit, numai după evoluția bolii pot apărea icter, crește temperatura și se simte o ușoară durere în ficat.

    Pentru a face un diagnostic cu precizie și a alege o metodă de tratament, medicul poate prescrie o varietate de teste: de la testele de sânge pentru anticorpi la ultrasunetele ficatului.

    Dar, hepatita este diagnosticată de sânge, toate studiile suplimentare sunt destinate, în principal, să înțeleagă cum virusul a afectat ficatul.

    La sesiune, medicul vă poate prescrie o analiză cantitativă pentru hepatita C. În acest articol vom analiza de ce este numit, pe măsură ce trece, rezultatele posibile și interpretarea lor. La sfârșitul materialului veți găsi un preț estimat pentru donarea de sânge pentru analiză.

    Ce este?

    Un astfel de studiu este realizat pentru a înțelege câte molecule de virus sunt prezente în organism.

    Analiza cantitativă este un test de sânge pentru prezența hepatitei. Acesta arată cum celulele din organism sunt infectate cu un virus, indiferent dacă boala se dezvoltă sau nu.

    Adică arată concentrația sau încărcătura ARN-ului hepatitic C în corpul uman în unități pe mililitru sau 1 centimetru cilindru de sânge.

    În schimb, analiza calitativă ajută la determinarea numai a prezenței ARN-ului virusului.

    În ce cazuri?

    Studiul se desfășoară în paralel cu o analiză calitativă după ce un test de sânge pentru prezența anticorpilor la hepatită (ELISA) a arătat un rezultat pozitiv. Faceți-o de mai multe ori:

    • în diagnosticul inițial al hepatitei C înainte de a lua o decizie cu privire la alegerea tratamentului;
    • în timpul tratamentului bolii (de obicei la 1, 4, 12 și 24 săptămâni) pentru a determina imaginea clinică a rezultatelor tratamentului;
    • după tratament pentru a determina recurența.

    importanță

    Analiza cantitativă este unul dintre principalele tipuri de cercetare pe care medicul se bazează în alegerea metodelor de tratament pentru hepatită. Aceasta servește:

    1. Înțelegeți cât de mult este infectat corpul cu un virus, prezența cantitativă a antigenilor în organism.
    2. Eficacitatea terapiei selectate.
    3. Alegeți o metodă de tratament și faceți previziunea.

    Cu toate acestea, această analiză nu permite evaluarea gradului de afectare a ficatului sau a severității bolii pentru organism. Pentru a face acest lucru, utilizați alte cercetări, de exemplu, analize biochimice ale sângelui, elastometriei, biopsiei și altele.

    Metodă și termene limită

    Prelevarea de probe de sânge dintr-o venă are loc de obicei dimineața. Prin utilizarea reacției în lanț a polimerazei (PCR), un astfel de studiu poate fi numit unul dintre cele mai exacte în domeniul detectării virușilor.

    Fără utilizarea terminologiei științifice, procesul poate fi descris astfel: biomaterialul luat este amestecat cu anumite enzime care vă permit să copiați enzimele ARN sau ADN-ul virusului. Deci, până devine suficient din aceste molecule pentru a identifica agentul patogen.

    Termenul limită pentru emiterea rezultatelor variază în funcție de instituția medicală și de volumul acesteia. Rezultatele pot fi rezumate după 4-5 ore după începerea studiului. Prin urmare, rezultatul poate fi emis în ziua următoare după prelevarea de probe de sânge.

    Cu cât sunt mai moderne laboratorul, echipamentul și reactivii, pot fi obținute rezultate mai precise și mai rapide.

    Pregătirea pentru donarea de sânge

    Livrarea biomaterialului pentru analiză are loc dintr-o venă. Nu există recomandări speciale pentru pregătire, prin urmare regulile standard care trebuie respectate înainte de donarea de sânge pentru un studiu sunt relevante:

    1. Este mai bine să faceți acest lucru dimineața pe un stomac gol (ultima masă nu trebuie să fie mai devreme de 8-12 ore înainte de livrare).
    2. Dacă nu se colectează sânge dimineața, atunci nu trebuie să mâncați alimente grase la micul dejun (trebuie să se observe și intervalul de 8-12 ore).
    3. Refuzați de alcool, alimente grase și prăjite cu 1-2 zile înainte de studiu.
    4. Nu faceți analiza în ziua următoare sărbătorii de sărbătoare.
    5. Fumatul este interzis cu cel puțin o oră înainte de biomaterial.
    6. Înainte de a lua sânge, ar trebui să stai 10-15 minute în pace pentru a vă relaxa corpul, pentru a elimina impactul asupra rezultatelor stresului, fizic și psihic.
    7. Dacă luați medicamente sau medicamente similare, analiza poate fi efectuată la 10-14 zile după ultima doză. (acest fapt trebuie raportat medicului, poate că el va stabili o altă condiție).
    8. Biomaterialul nu renunță imediat după efectuarea unui examen rectal, radiografie, fizioterapie.
    9. Analizele inițiale și repetate sunt cel mai bine luate în același laborator (instituție medicală), astfel încât să poată utiliza diferite instituții pentru diferiți reactivi, echipamente, unități de măsură și precizie.

    Rezultatele de decodare

    În funcție de nivelul de concentrație a virusului în organism, se fac diverse concluzii cu privire la tratamentul bolii.

    Apoi, determinați eficacitatea tratamentului. Dacă, în timpul analizei repetate, încărcarea virusului este mai mică de 8 * 105 UI / ml, atunci se poate argumenta că terapia merge în direcția corectă și că există succes în lupta împotriva bolii.

    Se poate vorbi despre un răspuns virologic timpuriu, cu condiția ca prezența cantitativă a virusului ARN să fie redusă în a treia zi de tratament. Dar probabilitatea acestui lucru este la nivelul de 85%.

    Dacă, totuși, indicatorul este mai mare de 8 * 105 UI / ml, medicul trebuie să revizuiască regimul de tratament și să aleagă un regim mai adecvat. În consecință, cu cât este mai mare nivelul, cu atât virusul a lovit mai puternic corpul și prognosticul mai rău.

    În acest caz, rezultatele în laboratoare diferite pot fi indicate în UI / ml sau în copii pe ml. Factorul de conversie este diferit (variază de la 1 la 5) și depinde de metoda utilizată pentru a determina indicatorul cantitativ. Este general acceptat în practică că 1 UI / ml = 4 copii pe ml.

    Există vreo greșeală?

    Din păcate, diagnosticul poate fi eronat. Dar aceasta este doar dacă instalația medicală utilizează echipament depășit, reactivi inadecvați, atunci există o anumită proporție de rezultate incorecte.

    Astfel de factori pot afecta și:

    • prezența heparinei sau a inhibitorilor în sânge;
    • contaminarea biomaterialului în timpul cercetării.

    Cu pregătirea adecvată pentru analize în centrele moderne de tratament, această probabilitate este aproape de zero.

    Cine să contacteze și care este costul

    Dacă sunteți suspect de hepatită, trebuie să contactați un specialist virolog, specialist în boli infecțioase sau un hepatolog. Dacă este necesar, vă vor trimite altor medici.

    Prețul acestor studii poate fi diferit. În plus, depinde de marjele centrelor de diagnosticare și de complexitatea lucrărilor, echipamentelor etc.

    În laboratoarele moderne, puteți naviga la 2900-3000 ruble (1350-1400 UAH) fără costul de a lua sânge dintr-o venă. Există clinici care oferă o analiză de 300 de ruble (aproximativ 140 USD).

    Forma aproximativă a rezultatelor analizelor arată astfel.

    concluzie

    Pentru a rezuma articolul evidențiați principalele puncte:

    1. Analiza cantitativă a hepatitei C se numește teste de sânge pentru prezența celulelor virale, indicând sarcina sa.
    2. Indicatorul este măsurat în unități pe mililitru sau 1 centimetru cub de sânge.
    3. Analiza se face ca și în diagnosticul inițial și ulterior pentru a determina eficacitatea terapiei selectate sau detectarea recăderii.
    4. Nu permite să se vorbească despre nivelul de sănătate al ficatului, afectat ca urmare a infecției cu virusul hepatitei C. Pentru aceasta pot fi efectuate studii înrudite: analize biochimice de sânge, elastometrie, biopsie etc.
    5. Majoritatea donațiilor de sânge au loc dimineața, biomaterialul luat dintr-o venă.
    6. Nu este recomandat să fumați, să beți alcool, alimente grase sau prăjite înainte de a lua testul. În același timp, respectarea regulilor de pregătire pentru studiul indicat în articol este binevenită.
    7. Dacă analiza a arătat că încărcarea virusului în plasma sanguină este mai mare de 600 UI / ml, a apărut infecția și dezvoltarea hepatitei C în organism.
    8. În cazul în care analizele repetate arată o încărcătură mai mare de 8 * 105 UI / ml, medicul trebuie să revizuiască schema și metodele de tratament. Aceasta indică lipsa eficacității terapiei selectate.
    9. Probabilitatea de eroare în studiul cantitativ este extrem de mică. Cu toate acestea, este posibilă contaminarea biomaterialului, prezența inhibitorilor sau a heparinei, ceea ce va face ca analiza să fie falsă.
    10. Pragul inferior al costului procedurii este de 300 de ruble (fără prețul prelevării de sânge) și crește în funcție de reactivii utilizați, de echipamentele din laborator și de alți factori.

    Nr. 350СВ, determinarea cantitativă a ARN-ului virusului hepatitei C prin PCR [încărcătura virală] (încărcătura virală HCV, virusul hepatitei C (testul cantitativ)) în ser

    Determinarea ARN-ului virusului hepatitei C în ser prin metoda reacției în lanț a polimerazei (PCR) cu detectarea "timpului real".

    situs detectabil specific fragmentului ARN al virusului hepatitei C; Specificitatea determinării este de 100%. Sensibilitatea detecției - 60 UI / ml Intervalul liniar: 10 ^ 2 - 1 x 10 ^ 8 UI / ml.

    • Test pozitiv calitativ pentru prezența ARN-ului virusului hepatitei C în ser.
    • Determinarea încărcăturii virale.
    • Determinarea tacticii de tratare a pacienților.
    • Evaluarea corectă a eficacității tratamentului.

    Interpretarea rezultatelor cercetării conține informații pentru medicul curant și nu este un diagnostic. Informațiile din această secțiune nu pot fi utilizate pentru autodiagnosticare și auto-tratament. Diagnosticarea exactă este efectuată de către medic, utilizând atât rezultatele examinării, cât și informațiile necesare din alte surse: anamneza, rezultatele altor examinări etc.

    Unități de măsură: cantitatea de ARN din virusul hepatitei C, exprimată în UI / ml. Pentru conversia la copii / ml, trebuie utilizat un raport de 1 IU = 2,5 copii ale ARN-ului virusului hepatitei C.

    • Informații generale
    • Exemple de rezultate

    * Perioada specificată nu include ziua de luare a biomaterialului

    Detectarea PCR în timp real.

    exemple de rezultate privind formularul *

    * Vă atragem atenția asupra faptului că, atunci când se comandă mai multe studii, mai multe rezultate ale cercetării pot fi reflectate pe un singur formular.

    În această secțiune, puteți afla cât costă finalizarea acestui studiu în orașul dvs., consultați descrierea testului și tabelul de interpretare a rezultatelor. Alegerea unde să treacă analiza "Determinarea cantitativă a ARN-ului virusului hepatitei C prin PCR [încărcătura virală] (încărcătura virală HCV, virusul hepatitei C (testul cantitativ)) în serul sanguin" în Moscova și în alte orașe rusești, nu uitați că prețul analizei, Costul procedurii biomateriale, metodele și calendarul cercetării în cabinetele medicale regionale pot varia.

    Medinfo.club

    Portal despre ficat

    Analiza și decodificarea cantitativă a HCV

    Hepatita C este o boală care se poate multiplica în celulele hepatice sănătoase și provoacă apariția bolilor proliferative. În lumea modernă, când virusul hepatitei a trecut o anumită mutație, sistemul imunitar uman este amenințat, deoarece, în comparație cu o infecție, este neglijabil. De asemenea, este de remarcat faptul că nu toți pacienții vor avea primele semne ale bolii, mai ales în stadiile incipiente.

    Analiza ARN a virusului hepatitei C este un studiu cantitativ, a cărui normă constă în cantitatea moderată de prezență de celule virale în sângele pacientului. Potrivit statisticilor, aproximativ 31% dintre pacienți sunt complet vindecați de această boală, dacă se află în stadiul inițial.

    În practica medicală, medicii observă că 4 milioane de simptome infectate și primele semne nu apar deloc, deși forma neglijată a hepatitei poate duce la ciroză hepatică sau cancer.

    În prezent, în timpul procedurii de "transfuzie de sânge", acest sânge este verificat pentru prezența virusului hepatitei C, deoarece această boală este transmisă prin sânge donator.

    Până în prezent, medicamentele pentru hepatita C au apărut deja în lume cu o eficiență apropiată de 100%. Industria farmaceutică modernă a creat medicamente care practic nu au efecte secundare. Mulți pacienți primesc primele rezultate sub forma ameliorării simptomelor și reducerea încărcăturii virale după o săptămână de aport. Citiți mai multe despre medicamentele pentru hepatită din producția indiană, citiți articolul nostru separat.

    Sofosbuvir Express sa dovedit a fi pe piața transportului de medicamente indiene împotriva hepatitei C. Această companie îi ajută pe oameni să se recupereze de la boală pentru mai mult de 2 ani. Recenzii și videoclipuri ale pacienților mulțumiți puteți vedea aici. În contul lor, mai mult de 4.000 de persoane recuperate datorită medicamentelor achiziționate. Nu vă puneți sănătatea în așteptare, vizitați www.sofosbuvir-express.com sau sunați la numărul 8-800-200-59-21

    Tipuri de studii PCR

    PCR (reacția în lanț a polimerazei) este metoda cea mai modernă și mai eficientă pentru studierea genei virale și a capacităților acesteia. O astfel de diagnosticare este capabilă să stabilească un tip de boală și să determine mutația sa ulterioară în corpul pacientului.

    Analiza este efectuată prin luarea de sânge, care este ulterior plasată în reactivi speciali în care are loc clonarea celulelor.

    De la o celulă se dovedesc două, și așa mai departe. Ca rezultat, există sute de ADN-uri, prin care puteți diagnostica patogenul și identifica virusul într-un stadiu incipient.

    Prin urmare, PCR este împărțit în mai multe tipuri:

    • analiza calitativă - recunoaște infecția genelor în sânge. Dacă în timpul analizei calitative a pacientului boala este confirmată, atunci ar trebui efectuată o analiză cantitativă pentru a stabili amploarea infecției. Ca urmare a acestui diagnostic, experții scriu "detectat / detectat". "Detectat" - spune că boala este prezentă în organism și că ARN-ul său a fost deja identificat. "Nu este detectat" - indică absența unei gene genetice în probă, adică nu există ARN hepatitic. Dar medicii recomandă retestarea după 10 zile.
    • analiza cantitativă - determină cantitatea de material genetic al infecției din sânge. Un astfel de diagnostic ajută la stabilirea severității bolii și a întregului istoric clinic. Ca urmare a unei astfel de analize, pot fi scrise doar "Pozitive / Negative / Invalide". "Pozitive" - ​​reprezintă sarcina infecțioasă. Medicii prescriu această metodă de diagnosticare a bolii pentru a determina eficacitatea tratamentului la 4, 12, 16 și 24 de săptămâni de boală. Dacă indicatorul de virus este în intervalul de 8x10 UI / ml, tratamentul este eficient, dacă ratele sunt mai mari, atunci nu. "Negativ" - gena infecției nu este detectată. "Invalid" - acest lucru se întâmplă dacă gena virusului a fost detectată în calitate, dar nu a fost dezvăluită în analiza cantitativă. Există un lucru similar, cu condiția ca volumul de infecție să fie sub nivelul.

    Diferențe în analizele calitative și cantitative

    Virusul hepatitei C este diagnosticat în primul rând prin efectuarea unei analize cantitative, care este necesară pentru interpretarea corectă a bolii. Dar, în ciuda acestui fapt, metodele calitative și cantitative de diagnosticare au diferențele lor, de exemplu: rolul și sarcinile atribuite cercetării - calitative - confirmă prezența infecției după detectarea anticorpilor virusului și cantitativ - o metodă secundară care respinge sau confirmă boala pentru a face diagnosticul corect și unic.

    Interpretarea cercetării cantitative

    După diagnosticare, numai medicii pot interpreta rezultatul, deoarece nu ar trebui să fie prezentați în cifre, ci în cuvinte. Conform statisticilor, PCR cantitativ este cel mai sensibil test. Pentru a înțelege dacă un virus este prezent în organism, este necesar să înțelegeți și să știți că o analiză cantitativă a hepatitei C este interpretată folosind denumirea digitală (standard) a infecției:

    Utilizarea diagnosticului PCR

    Reacția în lanț a polimerazei (PCR) în biologia moleculară este o metodă experimentală pentru detectarea virușilor. Vă permite să creșteți în mod semnificativ concentrația anumitor fragmente de acid nucleic (ADN) în probele de material biologic, ceea ce face posibilă determinarea lor (recunoașterea) și numărarea.

    Analiza se efectuează după cum urmează. Materialul genetic (o probă de sânge), care poate include și gena dorită, este introdusă în tub. Există, de asemenea, primeri - segmente sintetizate chimic, cu o lungime mică a genei dorite.

    ADN sau ARN polimeraza este, de asemenea, adăugată la vas, fiind capabil să alinieze un lanț al acidului nucleic care este complet identic cu cel original. Compoziția rezultată este injectată și un set de patru nucleotide libere - un material de construcții special pentru ARN sau ADN, dintre care unul conține particule radioactive de fosfor.

    Amestecul rezultat este încălzit la 95-96 ° C, motiv pentru care două șuruburi ADN, care sunt în mod obișnuit împletite, sunt țesute. Apoi, medicamentul este răcit, moment în care primerii se atașează la regiunea dorită a genomului viral, împiedicând din nou ARN-ul (sau ADN-ul) să formeze din nou o dublă helix.

    În procesul de răcire, polimeraza caută un lanț nucleotidic liber. Pentru funcționarea acestei enzime este necesar un singur lanț de nucleotide. Deoarece polimerazele se alunecă de-a lungul lanțului ADN (ca un inel pe o coardă), nu este capabil să lucreze pe o dublă helix.

    După aceasta se efectuează un ciclu de încălzire repetat, datorită căruia lanțurile de nucleotide sunt separate. La fiecare dintre aceste cicluri de PCR, cantitatea din proba gena dorită de hepatită crește exponențial, iar restul materialului genetic este produs (crește) liniar.

    După purificarea soluției din resturile nucleotidice și separarea prin electroforeză a lanțurilor ADN prin parametrul de greutate moleculară, se poate determina cu ușurință dacă există sau nu o genă dorită în proba studiată.

    Beneficiile PCR

    Testele de laborator folosind PCR permit obținerea și a mai multor informații decât prezența virusului ARN. Prin determinarea parametrului nivelului radiației radioactive, este posibil să se identifice cât de mult material genetic a fost conținut inițial în proba studiată. În cazul hepatitei, determinați indicatorul nivelului încărcăturii virale.

    Un alt avantaj al acestei metode este gradul foarte ridicat de sensibilitate al reacției CR. Este mult mai mare decât metodele clasice de detectare a virușilor. În mod ideal, pentru a identifica gena dorită, pentru PCR, este suficient un singur virus din probă.

    În plus, PCR este complet specific. Primerii săi sunt proiectați astfel încât să corespundă pe deplin regiunilor unice ale genelor dorite pe care nici o altă secvență nu le are. Ca amprentele digitale sunt unice, există secvențe nucleotidice unice în fiecare genă.

    Analiza calitativă a PCR

    Analiza calitativă vă permite să identificați numai prezența unui virus în sânge. Acest test trebuie efectuat pentru toți pacienții la care s-au găsit anticorpi împotriva hepatitei C. Aceasta poate avea ca rezultat numai una dintre cele două valori: "detectat" sau "nu este detectat". La o persoană sănătoasă, norma (valoarea de referință) trebuie să fie "nedetectată".

    Există o interpretare specială a unor astfel de rezultate ale cercetării calitative:

    • Rezultatul este "detectat". Aceasta înseamnă că un fragment de ARN care este specific pentru virusul hepatitei C a fost găsit în proba analizată a materialului biologic realizat. În consecință, există un fapt că pacientul este infectat cu virusul hepatitei C. Dacă rezultatul PCR de înaltă calitate este "detectat", acest lucru indică faptul că virusul se multiplică și în acest moment infectează celulele hepatice noi în organism.
    • Rezultatul nu este "detectat". Un astfel de verdict arată că în eșantionul analizat de material biologic obținut în acest laborator nu a fost găsit nici un fragment de ARN care să fie specific pentru virusul hepatitei C. Alternativ, concentrația ARN a infecției patogene din această probă a fost sub limita de sensibilitate a testului.

    În faza acută a ARN-ului virusului hepatitei C, astfel de studii calitative prin metoda PCR pot fi detectate deja după 1-2 săptămâni imediat după infectarea organismului, cu mult înainte de apariția anticorpilor la hepatită în sine.

    Rezultatele inexacte ale acestui studiu pot fi obținute prin:

    • biomaterial contaminat;
    • prezența heparinei în sângele pacientului;
    • prezența în eșantion de substanțe chimice sau proteice (inhibitori) care afectează diferitele componente ale PCR.

    Pentru a efectua o analiză calitativă a PCR, nu este necesară pregătirea specială a pacientului pentru studiu. Sângele venos este folosit ca material.

    Evaluarea rezultatelor

    Testele PCR de înaltă calitate au un anumit grad de sensibilitate și, în funcție de precizia cercetării, nivelul echipamentului din laborator poate varia de la 10 la 500 UI / ml.

    Aceasta înseamnă că, dacă virusul din probele de sânge este prezent într-o concentrație foarte scăzută (mai mică decât pragul de sensibilitate al acestui laborator), atunci rezultatul poate fi determinat ca "nedetectat" la un pacient pacient. Din acest motiv, atunci când efectuați o analiză calitativă a PCR cu un nivel scăzut de viremie (concentrație scăzută a virusului), de exemplu, pentru pacienții supuși terapiei antivirale, este foarte important să cunoașteți pragul de sensibilitate al acestui sistem de diagnosticare.

    Variante de sisteme de diagnostic

    Pentru a controla răspunsul virologic, se recomandă utilizarea sistemelor de diagnosticare cu un prag de sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml pentru tratamentul antiviral. Aceste criterii sunt îndeplinite, de exemplu, cu ajutorul analizorilor Cobas Ampicolor HCV-Test (cu precizie de 50 UI / ml), precum și a ARN-ului RealBest HCV (cu o sensibilitate de 15 UI / ml).

    Conform recomandărilor OMS, pentru a stabili un diagnostic definitiv al hepatitei C, este necesar să se bazeze doar pe baza detecției triple a ARN-ului virusului C în probele serice ale unui pacient, în absența altor varietăți de markeri hepatici.

    În plus față de metodele PCR, se utilizează, de asemenea, un test TMA (metoda de amplificare transcripțională) pentru detectarea ARN HCV la pacienți. Are cel mai bun prag de sensibilitate (5-10 UI / ml), dar în țara noastră o astfel de metodă de testare nu este încă foarte frecventă.

    Gama modificărilor detectabile ale virusului

    O astfel de determinare calitativă în serul prezenței ARN a virusului hepatitei C face posibilă determinarea mai multor genotipuri ale acestui virus. În prezent, știința cunoaște mai mult de șase genotipuri ale acestui virus, precum și aproximativ 10 subtipuri ale acestei boli.

    În țara noastră, virusurile comune 1, 2, 3 genotipuri. Laboratoarele pot detecta următoarele genotipuri: 1a și 1b, 2a, 2b și 2c, precum și 3, 4, 5a și 6, indiferent de subtipuri. Pentru toate modificările de virus, specificitatea de detecție este de 100%.

    Analiza cantitativă PCR

    Cu ajutorul unui test cantitativ PCR, se determină nivelul concentrației virusului hepatitei în probele de sânge (încărcătura virală). Acest test pentru viremia (concentrația virusului) vă permite să determinați numărul de unități dintr-un anumit material genetic (cel mai viral ARN), care este detectat într-o anumită cantitate. În acest caz, determinați concentrația acestuia în 1 ml, care corespunde cu 1 cu. cm.

    Parametrii de analiză cantitativă sunt exprimați în cifre, în acest scop sunt utilizate ca unități de măsură unitățile internaționale (UI) pe mililitru (ml), denumite UI / ml. Acum, în unele laboratoare, cantitatea de virus poate fi determinată în alte unități: numărul de exemplare pe ml este indicat ca copii / ml.

    • Date pentru hepatita C, o astfel de analiza cantitativa a PCR se face imediat inainte de inceperea tratamentului. Apoi, în săptămânile 1, 4, 12 și 24. Evaluarea pe săptămâna a 12-a este orientativă, permite determinarea eficacității terapiei.
    • Pregătirea pentru analiză. Pentru a efectua o analiză cantitativă a PCR, nu este necesară pregătirea specială a pacientului pentru studiu. Cu jumătate de oră înainte de eșantionare nu ar trebui să fumeze. Sângele venos este folosit ca material de laborator.

    Evaluarea rezultatelor

    Pentru diferite sisteme de testare de laborator, există diverși factori de conversie pentru acest indicator în UI / ml. În medie, ei iau un parametru de conversie, în care 4 copii / ml = 1 UI / ml. De exemplu, dacă laboratorul dă rezultatul analizei PCR 2,4 * 10 6 copii / ml, atunci acest parametru trebuie împărțit în 4 și vom obține 6 * 10 5 UI / ml.

    O sarcină de 800.000 UI / ml este considerată ridicată, care corespunde aproximativ la 3.000.000 copii / ml. Viremia scăzută, conform unor autori, corespunde parametrilor PCR cantitativ sub 400.000 UI / ml.

    Ca urmare a testului cantitativ, rezultatele finale pot fi furnizate nu sub forma unei valori digitale, ci: "sub domeniul de măsurare" sau "nedetectat".

    • Evaluare: "sub gama de măsurare." Acest lucru sugerează că testul cantitativ nu a putut detecta ARN viral de hepatită C, dar virusul în sine este prezent în organism în concentrații foarte scăzute. Acest lucru este evidențiat de un test calitativ suplimentar, care confirmă prezența virusului.
    • Evaluare: nu a fost detectat. Acest rezultat arată că testul cantitativ nu a fost găsit în proba ARN-ului de virus.

    Parametrul încărcăturii virale determină, în primul rând, gradul de infecție al bolii, nivelul de "infecțiozitate" al pacientului. Cu cât este mai mare concentrația de virus a pacientului, cu atât este mai mare probabilitatea de a le transmite altor persoane. De exemplu, în timpul actului sexual cu o persoană bolnavă sau pe verticală. Acest indicator cantitativ ajută la determinarea eficacității tratamentului pacientului.

    Efectuarea unei analize cantitative a PCC este importantă pentru terapia antivirală, evaluarea succesului și planificarea duratei cursului. Astfel, cu un răspuns rapid al organismului la tratament și un grad scăzut de viremie, durata terapiei poate fi redusă.

    Dacă parametrul cantitativ PCR este redus încet, terapia antivirală trebuie prelungită sau modificată. Dacă nivelul încărcăturii virale este scăzut, atunci acesta este un factor favorabil pentru terapie, dar dacă este crescut, atunci metoda utilizată este ineficientă și medicamentele sau metodele de utilizare a acestora trebuie schimbate.


    Articolul Precedent

    Paratormonul intact

    Articole Hepatita