Decodificarea analizei PCR pentru hepatita C

Share Tweet Pin it

Un studiu de laborator special - analiza PCR pentru hepatita C - simplifică foarte mult diagnosticul acestei boli virale. Hepatita C nu este o excepție. O probă mică de sânge poate fi testată pentru conținutul de rna și alte materiale genetice ale agentului viral. Toți indivizii cu anticorpi la hepatita C care circulă în plasmă sanguină, a căror prezență confirmă detectarea calitativă, sunt analizați prin PCR.

Interpretarea rezultatelor este interpretată în coloana formularului de cercetare ca o analiză "pozitivă" sau "negativă". În plus, prin utilizarea PCR este posibilă nu numai determinarea conținutului minim al virusului, ci și numărarea numărului de particule. Astfel, este posibil să se determine sarcina virală estimată și să se determine tacticile de tratament medical cât mai exact posibil.

Virusul hepatic viral

Ficatul ca element al tractului digestiv are o povară uriașă. În celulele sale, se produc cele mai multe reacții metabolice ale tuturor tipurilor de metabolism, ceea ce asigură o funcționare optimă a tuturor organelor și sistemelor. În același timp, valoarea sa de detoxifiere este excelentă pentru eliminarea zgurilor și a produselor metabolice cu bilă enzimatică.

Înfrângerea ficatului de viruși de natură diferită este extrem de periculoasă pentru organism. O imagine clinică diversă și nerespectarea tratamentului determină hepatita la primul loc în ceea ce privește riscurile pentru sănătate. Hepatita C este cronică și poate fi negativă pentru o lungă perioadă de timp, paralizând lent în corpul uman. Virusul este transmis prin fluide biologice: sânge și mai puțin frecvent prin spermă. Abuzul de droguri al seringilor nesterile, livrarea naturală a femeilor infectate, vătămările accidentale sau reducerea de către lucrătorii din domeniul sănătății poate duce la transmiterea virusului la persoanele sănătoase.

Diagnosticarea în timp util a bolii este împiedicată de imaginea clinică ascunsă și de patologia nesistematică. Un rezultat pozitiv poate fi ratat pur și simplu prin analize slab performante. Doar o afectare semnificativă a celulelor hepatice determină o anumită simptomatologie, totuși, efectul negativ al viremiei nu lasă nici o șansă de restabilire a organului.

Medicina modernă a dezvoltat metode speciale pentru recunoașterea celor mai mici urme ale virusului. PCR, IFA, biopsia hepatică poate detecta cea mai mică afectare a ficatului și nivelul minim al anticorpilor împotriva virusului. Analiza cu ajutorul PCR este cea mai simplă și cea mai fiabilă practică de diagnosticare.

Analiza calitativă

Esența reacției polimerazice este generarea unei secvențe de rna. Reacția se desfășoară în prezența acelorași proteine ​​virale în plasma sanguină.

Catalizatorii speciali vă permit sintetizarea unei secvențe virale similare a lanțului, care este comparată cu nucleotidele cunoscute ale ARN-ului viral. Pe această bază determină încărcarea virală și afectarea ficatului.

PCR poate captura chiar și o singură prezență a genei dorite în sângele luat. O astfel de reacție în lanț de diagnostic este, de asemenea, foarte specifică. Secvența lanțurilor de nucleotide este unică pentru fiecare creatură, astfel încât primii enzimatici creează secvențe identice ale informațiilor genetice dorite. Astfel, orice virus poate fi detectat cu cea mai mică precizie, chiar dacă indicatorul său cantitativ este extrem de mic.

Pacienții în ale căror sânge s-au găsit anticorpi produși împotriva hepatitei virale, efectuează un studiu calitativ al PCR sau Eph. Rezultatul analizei poate fi pozitiv și negativ, ceea ce necesită tratament în ambele cazuri.

Răspunsul pozitiv al reacției în lanț ar trebui să fie descifrat ca prezența fragmentelor de ARN ale virusului hepatitei sau ca fenomen de infecție.

În plasma de sânge în momentul în care virusul se înmulțește activ și parazit asupra celulelor hepatice. Diagnosticarea PCR poate da un răspuns negativ dacă există puține particule de ARN viral în plasmă, sub nivelul de sensibilitate al testului sau deloc. După infecția directă, cantitatea de virus creste relativ încet, și numai după 1-2 săptămâni, dacă o altă cercetare calitativă este capabilă să le izoleze.

Analiza negativă poate fi obținută în următoarele cazuri:

  1. Atunci când luați material în condiții necorespunzătoare, obțineți un eșantion de sânge cu contaminare;
  2. Când un pacient a primit anterior injecții cu heparină.
  3. Cu prezența altor enzime și substraturi în eșantioanele luate care perturbă cursul reacției în lanț.

Analiza cantitativă

Testarea cantitativă ca diagnostic microbiologic este proiectată pentru a determina încărcătura virală. O analiză calitativă confirmată pentru viremie servește drept bază pentru determinarea cantității de material genetic și a concentrației acesteia. Numărul de rna viral detectat este determinat într-o unitate de volum de sânge, de obicei în 1 mililitru. Materialele necesare sunt exprimate în unități internaționale, unele laboratoare utilizează numărul de copii în analiza eif.

De obicei, înainte de orice regim terapeutic, PCR este analizat cantitativ. Numărarea rna virale este efectuată destul de des: după una, patru, douăsprezece și douăzeci și patru de săptămâni. Cea de-a 12-a săptămână este considerată orientativă, deoarece, pe baza analizei, în această perioadă se efectuează interpretarea eficacității măsurilor terapeutice.

Analiza cantitativă utilizând PCR sau IFA implică prelevarea probelor dintr-o venă.

Interpretarea rezultatelor ca o încărcătură virală mare începe de la o cifră de 800.000 UI / ml. Un astfel de rezultat pozitiv pentru hepatita C reflectă prezența a cel puțin 3.000.000 de exemplare pe mililitru de sânge. Nivelul scăzut de viremie se oprește la 400.000 UI / ml. Rezultatele studiului pot fi valori ca răspuns negativ, precum și indicatorul "sub intervalul de măsurare".

Un test cantitativ cu o estimare de "sub gama de masurare" spune ca in timpul reactiei nu a fost posibil sa se calculeze ARN-ul. Virusul încă circulă în organism, după cum indică un test calitativ pozitiv. Un indicator negativ al analizei cantitative a lui pcr sau ifa indică absența RNA în această probă de sânge.

În ciuda metodelor limitate de transmitere a virusului prin sânge, riscul de transmitere a virusului prin secrețiile glandelor sexuale de la mamă la copil crește.

Analiza cantitativă oferă asistență semnificativă în evaluarea intervențiilor terapeutice. Dacă IF și PCR reflectă acțiunea medicamentelor antivirale, ajută la stabilirea momentului terapiei și la evaluarea formării imunității pacienților. Răspunsul negativ timpuriu al testelor de laborator indică un tratament de succes și necesitatea de a reduce durata tratamentului. Scăderea ușoară a viremiei poate fi interpretată ca necesitatea modificării cursului terapeutic. Nivelul încărcăturii virale determină prognosticul bolii. Hepatita cu o rată scăzută este probabil pur și simplu tratată și virusul poate fi complet eliminat din organism. Ratele ridicate ale prezenței virale în sânge necesită o atenție deosebită și un tratament versatil.

Utilizarea diagnosticului PCR

Reacția în lanț a polimerazei (PCR) în biologia moleculară este o metodă experimentală pentru detectarea virușilor. Vă permite să creșteți în mod semnificativ concentrația anumitor fragmente de acid nucleic (ADN) în probele de material biologic, ceea ce face posibilă determinarea lor (recunoașterea) și numărarea.

Analiza se efectuează după cum urmează. Materialul genetic (o probă de sânge), care poate include și gena dorită, este introdusă în tub. Există, de asemenea, primeri - segmente sintetizate chimic, cu o lungime mică a genei dorite.

ADN sau ARN polimeraza este, de asemenea, adăugată la vas, fiind capabil să alinieze un lanț al acidului nucleic care este complet identic cu cel original. Compoziția rezultată este injectată și un set de patru nucleotide libere - un material de construcții special pentru ARN sau ADN, dintre care unul conține particule radioactive de fosfor.

Amestecul rezultat este încălzit la 95-96 ° C, motiv pentru care două șuruburi ADN, care sunt în mod obișnuit împletite, sunt țesute. Apoi, medicamentul este răcit, moment în care primerii se atașează la regiunea dorită a genomului viral, împiedicând din nou ARN-ul (sau ADN-ul) să formeze din nou o dublă helix.

În procesul de răcire, polimeraza caută un lanț nucleotidic liber. Pentru funcționarea acestei enzime este necesar un singur lanț de nucleotide. Deoarece polimerazele se alunecă de-a lungul lanțului ADN (ca un inel pe o coardă), nu este capabil să lucreze pe o dublă helix.

După aceasta se efectuează un ciclu de încălzire repetat, datorită căruia lanțurile de nucleotide sunt separate. La fiecare dintre aceste cicluri de PCR, cantitatea din proba gena dorită de hepatită crește exponențial, iar restul materialului genetic este produs (crește) liniar.

După purificarea soluției din resturile nucleotidice și separarea prin electroforeză a lanțurilor ADN prin parametrul de greutate moleculară, se poate determina cu ușurință dacă există sau nu o genă dorită în proba studiată.

Beneficiile PCR

Testele de laborator folosind PCR permit obținerea și a mai multor informații decât prezența virusului ARN. Prin determinarea parametrului nivelului radiației radioactive, este posibil să se identifice cât de mult material genetic a fost conținut inițial în proba studiată. În cazul hepatitei, determinați indicatorul nivelului încărcăturii virale.

Un alt avantaj al acestei metode este gradul foarte ridicat de sensibilitate al reacției CR. Este mult mai mare decât metodele clasice de detectare a virușilor. În mod ideal, pentru a identifica gena dorită, pentru PCR, este suficient un singur virus din probă.

În plus, PCR este complet specific. Primerii săi sunt proiectați astfel încât să corespundă pe deplin regiunilor unice ale genelor dorite pe care nici o altă secvență nu le are. Ca amprentele digitale sunt unice, există secvențe nucleotidice unice în fiecare genă.

Analiza calitativă a PCR

Analiza calitativă vă permite să identificați numai prezența unui virus în sânge. Acest test trebuie efectuat pentru toți pacienții la care s-au găsit anticorpi împotriva hepatitei C. Aceasta poate avea ca rezultat numai una dintre cele două valori: "detectat" sau "nu este detectat". La o persoană sănătoasă, norma (valoarea de referință) trebuie să fie "nedetectată".

Există o interpretare specială a unor astfel de rezultate ale cercetării calitative:

  • Rezultatul este "detectat". Aceasta înseamnă că un fragment de ARN care este specific pentru virusul hepatitei C a fost găsit în proba analizată a materialului biologic realizat. În consecință, există un fapt că pacientul este infectat cu virusul hepatitei C. Dacă rezultatul PCR de înaltă calitate este "detectat", acest lucru indică faptul că virusul se multiplică și în acest moment infectează celulele hepatice noi în organism.
  • Rezultatul nu este "detectat". Un astfel de verdict arată că în eșantionul analizat de material biologic obținut în acest laborator nu a fost găsit nici un fragment de ARN care să fie specific pentru virusul hepatitei C. Alternativ, concentrația ARN a infecției patogene din această probă a fost sub limita de sensibilitate a testului.

În faza acută a ARN-ului virusului hepatitei C, astfel de studii calitative prin metoda PCR pot fi detectate deja după 1-2 săptămâni imediat după infectarea organismului, cu mult înainte de apariția anticorpilor la hepatită în sine.

Rezultatele inexacte ale acestui studiu pot fi obținute prin:

  • biomaterial contaminat;
  • prezența heparinei în sângele pacientului;
  • prezența în eșantion de substanțe chimice sau proteice (inhibitori) care afectează diferitele componente ale PCR.

Pentru a efectua o analiză calitativă a PCR, nu este necesară pregătirea specială a pacientului pentru studiu. Sângele venos este folosit ca material.

Evaluarea rezultatelor

Testele PCR de înaltă calitate au un anumit grad de sensibilitate și, în funcție de precizia cercetării, nivelul echipamentului din laborator poate varia de la 10 la 500 UI / ml.

Aceasta înseamnă că, dacă virusul din probele de sânge este prezent într-o concentrație foarte scăzută (mai mică decât pragul de sensibilitate al acestui laborator), atunci rezultatul poate fi determinat ca "nedetectat" la un pacient pacient. Din acest motiv, atunci când efectuați o analiză calitativă a PCR cu un nivel scăzut de viremie (concentrație scăzută a virusului), de exemplu, pentru pacienții supuși terapiei antivirale, este foarte important să cunoașteți pragul de sensibilitate al acestui sistem de diagnosticare.

Variante de sisteme de diagnostic

Pentru a controla răspunsul virologic, se recomandă utilizarea sistemelor de diagnosticare cu un prag de sensibilitate de cel puțin 50 UI / ml pentru tratamentul antiviral. Aceste criterii sunt îndeplinite, de exemplu, cu ajutorul analizorilor Cobas Ampicolor HCV-Test (cu precizie de 50 UI / ml), precum și a ARN-ului RealBest HCV (cu o sensibilitate de 15 UI / ml).

Conform recomandărilor OMS, pentru a stabili un diagnostic definitiv al hepatitei C, este necesar să se bazeze doar pe baza detecției triple a ARN-ului virusului C în probele serice ale unui pacient, în absența altor varietăți de markeri hepatici.

În plus față de metodele PCR, se utilizează, de asemenea, un test TMA (metoda de amplificare transcripțională) pentru detectarea ARN HCV la pacienți. Are cel mai bun prag de sensibilitate (5-10 UI / ml), dar în țara noastră o astfel de metodă de testare nu este încă foarte frecventă.

Gama modificărilor detectabile ale virusului

O astfel de determinare calitativă în serul prezenței ARN a virusului hepatitei C face posibilă determinarea mai multor genotipuri ale acestui virus. În prezent, știința cunoaște mai mult de șase genotipuri ale acestui virus, precum și aproximativ 10 subtipuri ale acestei boli.

În țara noastră, virusurile comune 1, 2, 3 genotipuri. Laboratoarele pot detecta următoarele genotipuri: 1a și 1b, 2a, 2b și 2c, precum și 3, 4, 5a și 6, indiferent de subtipuri. Pentru toate modificările de virus, specificitatea de detecție este de 100%.

Analiza cantitativă PCR

Cu ajutorul unui test cantitativ PCR, se determină nivelul concentrației virusului hepatitei în probele de sânge (încărcătura virală). Acest test pentru viremia (concentrația virusului) vă permite să determinați numărul de unități dintr-un anumit material genetic (cel mai viral ARN), care este detectat într-o anumită cantitate. În acest caz, determinați concentrația acestuia în 1 ml, care corespunde cu 1 cu. cm.

Parametrii de analiză cantitativă sunt exprimați în cifre, în acest scop sunt utilizate ca unități de măsură unitățile internaționale (UI) pe mililitru (ml), denumite UI / ml. Acum, în unele laboratoare, cantitatea de virus poate fi determinată în alte unități: numărul de exemplare pe ml este indicat ca copii / ml.

  • Date pentru hepatita C, o astfel de analiza cantitativa a PCR se face imediat inainte de inceperea tratamentului. Apoi, în săptămânile 1, 4, 12 și 24. Evaluarea pe săptămâna a 12-a este orientativă, permite determinarea eficacității terapiei.
  • Pregătirea pentru analiză. Pentru a efectua o analiză cantitativă a PCR, nu este necesară pregătirea specială a pacientului pentru studiu. Cu jumătate de oră înainte de eșantionare nu ar trebui să fumeze. Sângele venos este folosit ca material de laborator.

Evaluarea rezultatelor

Pentru diferite sisteme de testare de laborator, există diverși factori de conversie pentru acest indicator în UI / ml. În medie, ei iau un parametru de conversie, în care 4 copii / ml = 1 UI / ml. De exemplu, dacă laboratorul dă rezultatul analizei PCR 2,4 * 10 6 copii / ml, atunci acest parametru trebuie împărțit în 4 și vom obține 6 * 10 5 UI / ml.

O sarcină de 800.000 UI / ml este considerată ridicată, care corespunde aproximativ la 3.000.000 copii / ml. Viremia scăzută, conform unor autori, corespunde parametrilor PCR cantitativ sub 400.000 UI / ml.

Ca urmare a testului cantitativ, rezultatele finale pot fi furnizate nu sub forma unei valori digitale, ci: "sub domeniul de măsurare" sau "nedetectat".

  • Evaluare: "sub gama de măsurare." Acest lucru sugerează că testul cantitativ nu a putut detecta ARN viral de hepatită C, dar virusul în sine este prezent în organism în concentrații foarte scăzute. Acest lucru este evidențiat de un test calitativ suplimentar, care confirmă prezența virusului.
  • Evaluare: nu a fost detectat. Acest rezultat arată că testul cantitativ nu a fost găsit în proba ARN-ului de virus.

Parametrul încărcăturii virale determină, în primul rând, gradul de infecție al bolii, nivelul de "infecțiozitate" al pacientului. Cu cât este mai mare concentrația de virus a pacientului, cu atât este mai mare probabilitatea de a le transmite altor persoane. De exemplu, în timpul actului sexual cu o persoană bolnavă sau pe verticală. Acest indicator cantitativ ajută la determinarea eficacității tratamentului pacientului.

Efectuarea unei analize cantitative a PCC este importantă pentru terapia antivirală, evaluarea succesului și planificarea duratei cursului. Astfel, cu un răspuns rapid al organismului la tratament și un grad scăzut de viremie, durata terapiei poate fi redusă.

Dacă parametrul cantitativ PCR este redus încet, terapia antivirală trebuie prelungită sau modificată. Dacă nivelul încărcăturii virale este scăzut, atunci acesta este un factor favorabil pentru terapie, dar dacă este crescut, atunci metoda utilizată este ineficientă și medicamentele sau metodele de utilizare a acestora trebuie schimbate.

Analiza calitativă pentru hepatita C

Lasă un comentariu 7,180

O analiză calitativă a reacției în lanț a polimerazei - PCR pentru hepatita C determină prezența sau absența VHC în organism. În condiții de laborator, se studiază structura ARN, care va include virusul. În cazul detectării virusului C, este necesar să se efectueze un curs de tratament, deoarece starea neglijată a ficatului va avea consecințe grave. PCR de înaltă calitate se efectuează și după recuperare pentru a confirma absența anticorpilor. Atribuit pentru inspecția de rutină. Cu o concentrație scăzută a agentului cauzal în sânge, PCR (calitativ) nu poate detecta nimic, deoarece sistemul de diagnosticare are propriile praguri de sensibilitate. În cazul fazei inițiale a bolii sau a formei ușoare, ultra-diagnoza PCR se efectuează pe echipamente ultrasensibile.

Ce este virusul ARN?

Termenul ARN al virusului hepatitei C (sau al virusului hepatitic C virus) este boala hepatică în sine. Virusul C se leagă de celula sănătoasă a corpului prin penetrarea în interior. În timp, răspândit în tot corpul, este necesar doar pentru a intra în sânge. Ca urmare, agentul patogen penetrează ficatul, se fixează cu celulele sale și lucrează din greu. Celulele hepatice (hepatocite) lucrează sub influența sa, suferă modificări și, din acest motiv, mor. Cu cât virusul C este mai lung în ficat, cu atât crește numărul celulelor. În timp, dezvoltați boli periculoase care duc la degenerare malignă și moarte.

Infecția ficatului cu acest tip de virus nu se poate manifesta pe plan extern. Timp de mai mulți ani sau zeci de ani, o persoană infectată se simte complet sănătoasă și doar o examinare aleatorie relevă cel mai adesea patologia. Când se donează sânge pentru hepatită, este examinată o parte a lanțului de ARN (acid ribonucleic), care face parte din gena umană (ADN). Rezultatele testelor de laborator nu ar trebui utilizate pentru auto-tratament, deoarece acesta este doar un indicator. Imaginea exactă și diagnosticul suplimentar sunt mai bine determinate de medic.

Când ați făcut: indicații pentru cercetare

În confirmarea VHC se efectuează analiza PCR (reacția în lanț a polimerazei). Studiile de PCR ajută la găsirea materialului patogen în structura ARN și prescrie o terapie eficientă. Numit în următoarele cazuri:

  • detectarea semnelor de inflamație a ficatului;
  • studii de screening pentru prevenire;
  • examinarea persoanelor aflate în contact;
  • diagnosticul de hepatită de origine mixtă (determinarea principalului agent patogen);
  • determinarea nivelului activității de reproducere a virusului în forma cronică;
  • ciroza hepatică;
  • pentru a determina eficacitatea tratamentului prescris.
Studiile de PCR sunt prescrise de un medic pentru a determina eficacitatea unui curs de tratament pentru hepatită.

Există o analiză atât calitativă, cât și cantitativă a PCR. PCR cantitativ indică raportul procentual dintre ARN și purtătorii de virusuri din sânge, iar calitativul indică prezența sau absența virală. Un indicator pozitiv al calității (prezența ARN-ului hepatitic C) necesită, de asemenea, cercetări cantitative. Un nivel ridicat de concentrație a agentului cauzal al hepatitei C este asociat cu riscul transmiterii sale, adică a infecției altor persoane. Numărătoarea redusă este mai bine tratabilă. Cantitatea de virusuri ARN din sânge nu este legată de intensitatea bolii. Analiza PCR se efectuează, de asemenea, în cazul terapiei cu interferon, pentru a prescrie durata și complexitatea cursului de tratament.

Caracteristicile analizei PCR de înaltă calitate pentru hepatita C

O analiză calitativă cu indicele de reacție în lanț a polimerazei este atribuită tuturor pacienților care au anticorpi la sângele hepatitei C. Cei care au fost bolnavi și recuperați trebuie să reia testul. Se recomandă trecerea testului pentru hepatita B, apoi, în cazul unei concluzii pozitive, și pentru hepatita D. De asemenea, reacția analizată calitativ trebuie efectuată împreună cu alte teste de sânge. Analizele vor arăta o imagine completă a răspândirii virale.

Din rezultatele testului, numai un test pozitiv pentru hepatita C va fi vizibil sau negativ, adică prezența sau absența unui virus. Dacă ieșirea este "detectată", virusul este și continuă să fie activ. Denumirea "nu a fost detectată" indică absența unui virus sau cantitatea mică. Cu acest indicator, trebuie avut în vedere faptul că sensibilitatea analitică a sistemelor de diagnosticare este diferită și că hepatita C de ARN poate fi încă în sânge, dar nu se manifestă în analiză.

Metoda PCR extrem de sensibilă, ultra-hepatita C, dezvăluie chiar și în cantități mici. Se utilizează un studiu de hibridizare fluorescentă, care este de multe ori mai mare decât sistemele standard PCR. Metoda este utilizată în mai multe cazuri:

  • presupuse forme ascunse de hepatită C;
  • Diagnosticarea PCR nu a confirmat patogenul, dar există anticorpi;
  • în cazul recuperării;
  • pentru a detecta infecția precoce.
Înapoi la cuprins

Analiza de decodificare

Decodificarea PCR a VHC afectează decizia finală atunci când face un diagnostic, în special cu metoda ultrametod. Principalul dezavantaj al acestui studiu este aderența strictă la condițiile sterile pentru eșantion și materiale. O ușoară abatere uneori prezintă concluzii analitice inexacte, complică diagnosticul și tratamentul ulterior. Analiza PCR pentru determinarea ARN-ului hepatitic nu prezintă întotdeauna cu încredere o imagine a bolii, uneori inexactități sunt permise și în ambele direcții.

Diagnosticarea virusului hepatitei, se recomandă utilizarea unui examen cuprinzător.

Norma indicatorilor

Absența anticorpilor JgM la hepatita virală C în rezultatele studiului este considerată normă în analiza reacției în lanț a polimerazei. În același timp, rezultatele analizei serologice indică prezența anticorpilor la virusul C și acest lucru este, de asemenea, în limitele normale. O definiție calitativă nu indică intensitatea bolii, ci doar dezvăluie agentul cauzator al hepatitei C în ARN. Această analiză este repetată după tratament pentru a confirma recuperarea efectivă.

abateri

Dacă sunt prezente anticorpi JgM la ARN-ul HCV, aceasta indică o infecție în curs de dezvoltare. Boala în același timp se desfășoară acut sau cronic, manifestată în diferite etape. Dacă se înregistrează o scădere a numărului de anticorpi, analiza va indica faptul că rezultatele tratamentului au fost obținute în timpul recuperării. Doar cazuri extrem de rare de fals pozitive se găsesc în diagnostic. Acestea se găsesc la femei în timpul sarcinii și la persoanele cu alte boli infecțioase.

Depistarea analizei pentru hepatita C

Bolile hepatice în lumea modernă sunt foarte relevante, deoarece acest organ este supus influenței negative din mediul înconjurător, al stilului de viață necorespunzător etc.

Dar există boli pe care absolut toată lumea le pot infecta și este extrem de dificil de prevăzut dacă acest lucru se va întâmpla sau nu. Aceasta, de exemplu, hepatita virală, care este transmisă în principal prin sânge și, inițial, nu se face cunoscută. În special, vorbim despre hepatita C.

Faptul că inițial virusul nu prezintă semne particulare complică grav diagnosticul, dar, totuși, există studii destul de eficiente și diverse care vor ajuta la identificarea problemei.

Principiul de bază al detectării bolii VHC este descifrarea testelor pentru hepatita C, adică compararea anumitor indicatori cu normele.

Condiții pentru obținerea indicațiilor

Diagnosticul hepatitei C este efectuat de oameni din diferite motive, în principal:

  • posibile hepatite posibile;
  • o persoană este în pericol;
  • diagnosticul este necesar în funcție de specificul lucrării;
  • femeile în timpul sarcinii sau în timpul planificării.

Există mai multe tipuri de diagnostice: unele dintre ele sunt studii superficiale, altele sunt profunde și foarte precise, principiul căruia este studiul abaterilor minime ale indicatorilor normali sau al detectării anumitor substanțe.

Pentru detectarea virusului hepatitei C în sânge uman, se folosesc 3 tipuri de metode de diagnostic, acestea fiind:

  1. Enzimă legată de testul imunosorbant (ELISA). Realizat în laborator, principiul constă în determinarea anticorpilor la hepatită, în special: IgG, IgM. Acest diagnostic nu va da un răspuns detaliat: o persoană este bolnavă sau nu, deoarece o treime din purtătorii anticorpilor nu sunt detectați. Acest lucru se întâmplă din cauza decalajului dintre intrarea virusului în organism și producția de anticorpi la acesta, deci aceasta este o analiză dubioasă și foarte superficială.
  2. Analiză imunoblotă recombinantă. Se efectuează numai pentru a confirma testele de laborator, dacă rezultatul este pozitiv, înseamnă că persoana este sau a fost un purtător al bolii. Anticorpii la virus nu sunt afișați imediat, chiar și după tratamentul cu succes al hepatitei. În plus, un rezultat fals este posibil datorită unor factori terți.
  3. Analiza de polimerază (PCR). Care este metoda cea mai exactă pentru determinarea hepatitei? - PCR unic. Este cel mai tânăr și mai precis mod de diagnosticare. Ea PCR poate da un răspuns detaliat despre cursul bolii, vă permite să setați concentrația virusului în sânge și genotipul său (există 6). Principiul se bazează pe detectarea virusului DNR / ARN în plasma sanguină. Această metodă ocolește toate cele de mai sus în ceea ce privește calitatea diagnosticului: cel puțin 20 de zile ar trebui să treacă înainte de manifestarea clinică a hepatitei și maximum 120 de zile înainte de producerea anticorpilor la 10-12 săptămâni de la intrarea virusului. Dar detectarea agentului cauzal în sânge nu poate fi în nici un fel falsă, singura restricție: trebuie să treacă 5 zile din momentul infectării, deoarece nu poate exista un virus în volumul de sânge testat.

PCR este efectuat pentru diagnosticare precisă, se întâmplă trei subspecii:

  1. Analiza calitativă. Cu aceasta, numai prezența virusului este determinată.
  2. Diagnosticare cantitativă. Folosit pentru a determina conținutul exact al virusului în volumul sanguin; în timpul tratamentului este folosit pentru a testa eficacitatea.
  3. Diagnosticul genotipic. Folosit pentru a determina genotipul, și mai târziu fenotipul virusului. Pentru a cunoaște genotipul agentului patogen este extrem de important pentru terapie, deoarece, în funcție de caracteristici, cursul și concentrația de aport de droguri se schimbă.

Analize auxiliare

În metodele de diagnostic, un rol important îl au testele suplimentare, care, uneori, schimbă complet caracteristicile tratamentului și uneori chiar indică un diagnostic diferit.

Analiza biochimică

Pentru a prescrie tratamentul adecvat și pentru a nu exacerba imaginea, trebuie să determinați în mod fiabil gradul de afectare a ficatului, pentru aceasta utilizați un test de sânge biochimic, care va arăta abateri de la norma în compoziția sa.

Modificările caracterizează caracteristicile afectării țesutului hepatic, acesta este: stadiul bolii, severitatea fibrozei, disfuncția ficatului. Metoda biochimică va arăta în sânge numărul real de bilirubină, proteine, uree, creatinină, zahăr, AST și ALT, fosfatoza alcalină, fier și gama-glutamiltranspeptidază. În plus, profilul lipidic și calitatea metabolismului proteinelor vor fi determinate.

diagnosticul fibroză

Fibroza este o deteriorare a țesuturilor hepatice, cursul depinde de gradul său, prin urmare, diagnosticul severității afectării țesutului este foarte important. Judecând după imaginea cursului bolii, medicul poate judeca urgența tratamentului: dacă situația este necritică, poate fi chiar amânată pentru a nu face rău altor organe cu medicamentele.

Alte analize

Uneori, pentru a obține o imagine completă a bolii, se utilizează o scanare cu ultrasunete a cavității abdominale și a glandei tiroide, un număr întreg de sânge. Persoanele în vârstă sunt diagnosticate cu sistemele cardiovasculare și digestive, plămânii.

Dacă nu este posibil să se efectueze analize standard ELISA / PCR, se efectuează analize specifice: analiza saliva și a altor lichide pentru prezența agentului patogen.

Indicatorii

Tehnologiile pentru diagnosticarea hepatitei C sunt la un nivel ridicat și, adesea, nu dau rezultate false.

În ciuda acestui fapt, este imposibil să se ofere o garanție de 100% a preciziei: sunt posibile rezultate fals pozitive.

Un test de sânge poate da un răspuns incorect în caz de nerespectare a regulilor de analiză sau pentru alți factori. Principalele motive pentru denaturarea rezultatelor:

  • unele infecții specifice care reacționează cu agenți de screening și testul este pozitiv;
  • sarcina de cercetare;
  • prezența substanțelor secundare în organism;
  • perturbarea sistemului imunitar;
  • încălcarea regulilor de prelevare a probelor de sânge.

Depistarea testelor pentru hepatita C

Depistarea testelor pentru hepatită se adresează unui specialist cu experiență care va determina anomalii ale fiecăruia dintre indicatori și va scrie o concluzie privind probabilitatea hepatitei.

La diagnosticarea prin ELISA, detectarea anticorpilor din sânge va indica fără îndoială că există sau a fost virusul hepatitei în corpul uman: fie că pacientul este bolnav acum, fie că a suferit boala și că antigele pur și simplu nu au avut timp să iasă din corp. Trebuie avut în vedere faptul că anticorpii nu funcționează imediat - trebuie să treacă un anumit timp pentru ca o astfel de analiză să dea rezultate fiabile, prin urmare, dacă este necesar, trebuie să redați sânge pentru testare.

Dacă diagnosticul de PCR a dat un răspuns pozitiv, atunci cu o probabilitate de 99% în organism este patogenul. În acest caz, este necesar să se determine gravitatea și să se realizeze genotiparea RNA pentru corectarea cursului și apoi să se înceapă imediat tratamentul, astfel încât hepatita să nu devină cronică. Aceste teste de polimerază sunt considerate foarte precise, deoarece pot detecta până la 1 reprezentant al virusului în celulă. Dacă rata de reacție în lanț a polimerazei nu este încălcată, atunci răspunsul este negativ și nu este nevoie să vă faceți griji.

La stabilirea hepatitei C, se utilizează determinări cantitative ale bilirubinei, ALT și AST, proteine. Conținutul acestora indică, de asemenea, gradul și severitatea bolii.

Tabelul general al indicatorilor de substanțe din sânge, care pot indica hepatita C după analiza biochimică:

Costul testelor de sânge și PCR pentru hepatita C

Hepatita C este o patologie inflamatorie in care celulele hepatice sunt afectate. Boala se dezvoltă ca urmare a penetrării virusului hepatitei C (HVC) în corpul uman.

Forma bolii poate fi acută sau cronică.

Cel mai adesea, simptome de forme acute ale bolii, majoritatea pacienților nu sunt disponibile, uneori, boala este însoțită de dureri în abdomen, a scăzut de performanță, oboseală crescută, tulburări de apetit, nuanță închisă de urină, modificări de culoare de fecale, îngălbenire a pielii și mucoaselor, dureri articulare. Aceste simptome apar de obicei la 6-8 săptămâni după infectare, dar pot apărea după șase luni.

Odată cu dezvoltarea unor astfel de fenomene, este necesar să se contacteze o instituție medicală și să fie supus unei examinări cuprinzătoare a întregului organism. Un test de sânge pentru hepatita C se efectuează ca parte a unui examen medical.

Astăzi, cu ajutorul tehnicilor moderne de diagnosticare, această patologie poate fi identificată în stadiul inițial de dezvoltare, ceea ce sporește foarte mult șansele de vindecare completă a bolii.

Următoarele grupuri de persoane trebuie să testeze hepatita C:

  • femeile în perioada de purtare a unui copil;
  • persoanele cu semne de hepatită;
  • personalul medical;
  • potențiali donatori de organe și de sânge;
  • dependenții de droguri, persoanele infectate cu HIV, viața promiscuă intimă.

Lista studiilor necesare

Ce teste trebuie să iau pentru hepatita C? Pentru a diagnostica exact boala, a identifica cauzele și a determina starea parenchimului hepatic, sunt necesare următoarele studii:

  • urină generală și teste de sânge;
  • analiza biochimică a sângelui;
  • Analiza PCR;
  • test de sânge pentru detectarea anticorpilor la HVC;
  • un test de sânge pentru anticorpii existenți la propriile celule hepatice;
  • biopsie hepatică.

Decodificarea testelor de sânge pentru hepatita C este efectuată de un specialist. Luați în considerare fiecare metodă de cercetare în detaliu, precum și vom înțelege ce analiză a hepatitei C este cea mai corectă.

Analiză generală

Atunci când efectuați un test de sânge general pentru hepatita C, puteți evalua starea pacientului. Modificările parametrilor sângelui nu sunt percepute ca simptome specifice ale hepatitei, dar cu această boală există tulburări precum:

  • concentrația redusă de hemoglobină, trombocite și leucocite;
  • crește conținutul de limfocite;
  • coagularea sângelui este încălcată;
  • viteza de sedimentare a eritrocitelor (ESR) crește.

Analiza generală a urinei face posibilă detectarea, în compoziția sa, a urobelinului - un pigment biliar care apare în urină ca urmare a funcționării insuficiente a ficatului.

Analiza biochimică

Analiza biochimică a sângelui la hepatita C face posibilă identificarea unor astfel de afecțiuni precum:

  • niveluri ridicate de enzime hepatice (alanin transaminază - ALT și aspartat aminotransferază - AST), care intră în sânge când hepatocitele sunt deteriorate. În condiții normale, acești indicatori pentru bărbați nu trebuie să fie mai mari de 37 UI / l, pentru femei - nu mai mari de 31 UI / l. O concentrație crescută de ALT și AST în hepatita asimptomatică C este adesea singurul simptom al acestei boli. În plus, creșterea fosfatazei alcaline a glutamil transpeptidazei în sânge (în mod normal nu este mai mare de 150 UI / l).
  • conținutul de bilirubină (atât general cât și direct) din sânge este depășit. Dacă nivelul de pigment galben în ser depășește 27-34 umol / L, icter apar (până la 80 mol / l într-un mod simplu, 86-169 pmol / L - un moderat, peste 170 mmol / l - formă severă).
  • Nivelul de albumină este redus, concentrația gama globulinelor, dimpotrivă, este crescută. Gammaglobulinele sunt alcătuite din imunoglobuline - anticorpi care protejează organismul împotriva substanțelor care provoacă boli.
  • creșterea concentrației trigliceridelor în sânge.

Testul PCR

Utilizând tehnica PCR, este posibil să se diagnosticheze agentul cauzal al bolii. Efectuarea acestei analize face posibilă detectarea unui virus în sânge, chiar dacă cantitatea sa este minimă. Analiza PCR pentru hepatita C face posibilă determinarea infecției existente în sânge deja după 5 zile de la momentul infecției, cu mult înainte de apariția anticorpilor.

Dacă rezultatul unui test de sânge pentru hepatita C prin PCR este pozitiv, aceasta indică prezența unei infecții active în organism. Folosind această metodă, puteți efectua un studiu calitativ și cantitativ al ARN-ului HVC.

În cursul analizei calitative a PCR pentru hepatita C, este posibil să se detecteze un virus existent în corpul uman.

Această procedură de diagnosticare se efectuează dacă se detectează anti-HVC în sânge.

Depistarea analizei pentru hepatita C conține informații despre faptul că o infecție a fost detectată sau nu a fost detectată în organism. În mod normal, nu se găsesc substanțe patologice în sânge.

Dacă testul hepatitei C este pozitiv, înseamnă că agentul patogen se împarte în mod continuu și infectează celulele hepatice.

Rezultatele acestei analize pot fi nesigure, este posibilă în următoarele cazuri:

  • biomaterial contaminat folosit;
  • în prezența heparinei în sânge;
  • în prezența substanțelor chimice sau proteice (inhibitori) în biomaterialul studiat, care afectează elementele PCR.

Analiza cantitativă a hepatitei C oferă informații despre cantitatea de virus conținută în sânge, adică determină încărcătura virală. Prin acest concept se înțelege volumul de ARN HVC prezent în sânge (de exemplu, în 1 ml). În interpretarea analizei cantitative pentru hepatita C, această valoare este exprimată în echivalent digital, măsurată în UI / ml.

Sângele pentru PCR pentru hepatita C este luat înainte de măsurile terapeutice. După ce analiza se efectuează la 1, 4, 12 și 24 de săptămâni. Studiul din săptămâna 12 este orientativ și se realizează pentru a evalua eficacitatea procedurilor medicale.

Dacă testul pentru hepatita C în timpul sarcinii este pozitiv și valorile încărcăturii virale sunt depășite, riscul de transmitere a agenților patogeni de la mamă bolnavă la copil crește de mai multe ori. De asemenea, cu valori crescute ale încărcăturii virale, implementarea măsurilor terapeutice este dificilă.

În conformitate cu transcrierea testelor pentru hepatita C, dacă valorile încărcăturii virale depășesc 800.000 UI / ml, atunci este mare. Dacă cifrele sunt sub 400.000 UI / ml, nivelul încărcăturii virale este considerat scăzut.

Analiza hepatitei C prin PCR este considerată cea mai corectă și are mai multe avantaje față de alte opțiuni de cercetare, și anume:

  • diagnosticul direct al agentului cauzal al bolii. Atunci când se efectuează studii tradiționale sunt determinate de prezența markerilor de proteine ​​care sunt produse reziduale ale agenților patogeni. Acest lucru indică numai faptul că infecția este prezentă în sânge. La testarea hepatitei C prin PCR, este posibil să se determine tipul de patogen al patologiei periculoase.
  • specificitatea tehnicii. În timpul acestei proceduri, o regiune unică de ADN este determinată în biomaterial care corespunde unui singur tip de agent patogen. Acest lucru minimizează probabilitatea rezultatelor false.
  • sensibilitate ridicată. Atunci când efectuați analiza PCR, puteți detecta cantitatea minimă de virus. Acest lucru este important dacă se identifică substanțe patogene condiționate, care reprezintă o amenințare numai dacă nivelul lor crește.
  • Atunci când se utilizează această tehnică într-o probă a biomaterialului, mai mulți agenți patogeni pot fi detectați dintr-o dată.
  • poate detecta infecții ascunse. În plus, analiza vă permite să diagnosticați microorganismele patogene care trăiesc în interiorul celulelor și au o variabilitate antigenică ridicată.

Dacă rezultatele testului sunt pozitive, atunci urme de virus se găsesc în biomaterial, atunci rețeaua are o infecție în organism.

O analiză PCR negativă pentru hepatita C înseamnă că nu există urme de infecție în biomaterial.

Studiu imunologic

Această metodă vă permite să identificați anticorpi la toate tipurile de virus hepatitic, precum și anticorpi la celulele hepatice ale propriului corp, aspectul căruia contribuie la dezvoltarea hepatitei autoimune.

Rezultatele obținute în timpul studiului sunt relevante timp de 3 luni, atunci ar trebui să redați sânge pentru hepatita C.

De asemenea, este posibil să se efectueze un studiu expres folosind benzi speciale de testare. Această analiză face posibilă determinarea anticorpilor la virusul C în compoziția sângelui și a saliva. Această procedură poate fi efectuată independent, la domiciliu.

Biopsie hepatică

Pentru a efectua o astfel de analiză, se efectuează un element al parenchimului hepatic și se efectuează o examinare histologică a biomaterialului obținut. Aceasta vă permite să evaluați starea corpului: să identificați focarele inflamatorii, necrotice, stadiul fibrozei și așa mai departe.

Astăzi sunt utilizate teste care înlocuiesc analiza histologică a parenchimului hepatic.

Pentru a evalua stadiul afectării hepatice și intensitatea procesului de inflamație, se utilizează biomarkeri sanguin venocizi specifici. Folosind FibroTest, puteți evalua gradul de creștere a țesutului fibros.

Când efectuați Actitest, puteți obține informații despre intensitatea proceselor patologice în parenchimul hepatic. Utilizarea Steatototesta poate diagnostica țesutul gras al ficatului și poate evalua amploarea acestui proces. Fibromax constă din toate testele de mai sus și poate include și alte studii.

Pregătirea pentru studiu

Ce teste sunt luate pentru hepatita C si cum am descoperit acest sau acel tip de cercetare. Este la fel de important să știți cum să vă pregătiți pentru analiză.

Pentru a obține rezultate fiabile, se recomandă respectarea următoarelor cerințe:

  • Testele hepatice C trebuie luate dimineața, pe stomacul gol. Ultima dată când alimentele trebuie consumate cu cel puțin 8 ore înainte de studiu.
  • Biomaterialul poate fi colectat în timpul zilei sau în seara. În acest caz, este important să treacă cel puțin 5-6 ore între ultima masă și analiză.
  • înainte de donarea de sânge pentru hepatita C, ceai, cafea, suc sau alte băuturi trebuie aruncate, este permisă numai apa.
  • Cu 48 de ore înainte de studiu, este necesar să se excludă utilizarea alimentelor grase, prăjite și băuturilor care conțin alcool.
  • cu cel puțin o oră înainte de analiză, trebuie să vă abțineți de la fumat.
  • analiza nu trebuie efectuată imediat după o examinare cu ultrasunete, instrumentală, radiografie, masaj sau fizioterapie.
  • cu o zi înainte de punerea în aplicare a studiului, este necesară excluderea utilizării medicamentelor și a activității fizice intense. Stresul emoțional este de asemenea contraindicat.
  • Se recomandă să petreceți 15 minute înainte de a efectua studiul într-o stare calmă.

Realizarea procedurii de colectare a sângelui

În cazul în care se obține testul pentru hepatita C? Eșantionarea biomaterialului pentru cercetări viitoare se efectuează în laboratorul unei instituții medicale sau la domiciliul pacientului.

Sângele dintr-o venă se administrează după cum urmează:

  • cu ajutorul unui turnichet special înfășurat în jurul antebratului pacientului, fluxul sanguin venos este oprit. Datorită unor astfel de manipulări, venele vor fi umplute cu sânge și vor fi mai vizibile, ceea ce va facilita foarte mult procesul de introducere a acului.
  • zona pielii în care se introduce acul este tratată cu atenție cu alcool sau lichid care conține alcool.
  • Un ac este introdus ușor într-o venă, apoi este atașat un tub de testare special conceput pentru colectarea sângelui.
  • Imediat după ce acul este introdus în venă, cablul de stoarcere este scos din brațul pacientului.
  • după ce s-a colectat volumul necesar pentru analiză, acul este îndepărtat ușor din venă.
  • un tampon steril de bumbac sau un tifon din tifon umezit cu alcool trebuie aplicat la locul injectării.
  • pentru a preveni apariția unui hematom, tamponul trebuie apăsat cu puțin efort împotriva zonei de introducere a acului, îndoiți brațul la articulația cotului și țineți-l în această poziție timp de câteva minute. Astfel de acțiuni vor ajuta, de asemenea, la stoparea mai rapidă a sângelui.

Cu condiția ca tehnica administrării interne să fie bună, această procedură este absolut sigură și nu provoacă senzații dureroase.

În cazuri rare, după recoltarea sângelui, venele se pot umfla. Acest fenomen se numește "flebită". O compresie (nu fierbinte) va ajuta la rezolvarea problemei, ar trebui aplicată pe zonele umflate ale pielii de mai multe ori pe zi.

Anumite probleme pot apărea și în cazul unei tulburări de sângerare. Luarea aspirinei, warfarinei și a altor diluanți ai sângelui poate cauza sângerare. De aceea, înainte de a efectua analiza, este necesar să refuzați să luați orice medicament. Dacă tratamentul nu poate fi anulat, trebuie să informați specialistul.

Date și prețuri

Cât de mult este testat pentru hepatita C? Rezultatele unui test de sânge pentru hepatită pot fi gata în câteva ore și în câteva zile (de regulă, nu mai mult de 8 zile). Durata pregătirii rezultatelor depinde de tipul de virus și de metoda de analiză aleasă. Mai rapid este studiul efectuat prin metoda PCR. Rezultatele în acest caz vor fi gata în doar câteva ore.

Cât costă un test de hepatită C? În funcție de clinică și de complexitatea studiului, prețul procedurii poate varia de la 400 la 11000 de ruble.

Trebuie să știți că poate dura câteva săptămâni pentru a forma o cantitate suficientă de anticorpi pentru HVC. Prin urmare, într-un stadiu incipient în dezvoltarea patologiei, rezultatul unui studiu poate fi fals negativ.

În plus, este posibilă obținerea unor date nesigure, cu analize de calitate slabă și încălcări ale condițiilor de transport a biomaterialului obținut (probele trebuie livrate la laborator maxim 2 ore după prelevarea de probe de sânge).

Dacă rezultatul studiului este pozitiv, trebuie să contactați imediat un medic pentru boli infecțioase. Specialistul va efectua o examinare suplimentară și va prescrie tratamentul adecvat.

Încă credeți că vindecarea hepatitei C este dificilă?

Judecând prin faptul că citiți aceste linii acum - victoria în lupta împotriva bolilor hepatice nu este de partea ta. Și te-ai gândit deja la terapia cu interferon? Este de înțeles, deoarece hepatita C este o boală foarte gravă, deoarece funcționarea corectă a ficatului este cheia sănătății și bunăstării. Greață și vărsături, piele gălbui sau gri, gust amar în gură, urină întunecată și diaree. Toate aceste simptome vă sunt cunoscute în primul rând.

Dar poate că este mai corect să nu tratezi efectul, ci cauza? Pentru tratamentul recomandăm folosirea medicamentelor autohtone moderne - sofosbuvir și daclatasvir. Citește mai mult >>

Studiu PCR pentru hepatita C: tipuri, indicații, transcript

Virusul hepatitic C este o boală gravă care apare cu afectarea ficatului. La optzeci la suta dintre pacienti, devine cronica. Virusul se înmulțește în celulele hepatice - hepatocite - și provoacă moartea lor. Țesutul moale este înlocuit cu focare de țesut conjunctiv, se dezvoltă fibroza.

Pe măsură ce se dezvoltă fibroza, ficatul nu este în măsură să-și îndeplinească funcțiile, începe ciroza hepatică, periculoasă datorită complicațiilor sale: presiune crescută în sistemul venoasei portal, sângerare gastrointestinală, coagulare sanguină afectată, modificări psihice datorate leziunilor nucleului creierului.

Cauza bolii este infecția cu un virus din familia Flaviviridae, care aparține tipului de virusuri ARN. Aceasta înseamnă că materialul genetic prin care se sintetizează proteinele agentului patogen este codificat în molecula de acid ribonucleic. Infecția are loc prin sânge, sexual, și de la o femeie însărcinată la făt. Din păcate, o perioadă suficient de mare de timp poate trece între infecție și începerea producției de anticorpi - de la două săptămâni la șase luni. Acest lucru nu permite determinarea infecției prin metoda imunotestei și începerea tratamentului în stadiile incipiente.

Ce este analiza PCR?

PCR este o metodă de analiză moleculară care permite detectarea materialului genetic al agentului patogen deja în prima săptămână după infecție utilizând reacția în lanț a polimerazei. Studiul are o specificitate ridicată, precizie și permite nu numai determinarea prezenței sau absenței virusului, ci și concentrarea și genotipul acestuia.

Pentru acest studiu, este luată sângele unui pacient în care ar putea fi localizat ARN-ul virusului. Primerii se adaugă la regiunile sintetizate artificial din sânge ale genei dorite de lungime mică, iar ARN polimeraza este o enzimă specială care crește în mod repetat cantitatea de material genetic al agentului patogen. Folosind un aparat special, se efectuează mai multe cicluri de încălzire și răcire. Apoi, materialul este analizat și comparat cu genele cunoscute ale virusului, pe baza cărora se face o concluzie cu privire la prezența sau absența infecției.

Tipuri de analize PCR pentru hepatita C

Există trei tipuri de analize PCR:

  1. Analiza calitativă a PCR. Prima etapă a studiului. Vă permite să identificați materialul genetic al virusului în sânge.

  • Analiza cantitativă a PCR. Vă permite să determinați încărcarea virală - concentrația materialului genetic al agentului patogen într-un mililitru de sânge. Acest studiu este efectuat înainte de începerea tratamentului și apoi în primul, al patrulea, al doisprezecelea, și (în cazul în care cursul este lung) de douăzeci și patrulea săptămână de tratament pentru a evalua eficacitatea acestuia.

  • Genotipare. Agentul cauzal al hepatitei C se mută frecvent și rapid. Au existat șapte variante ale acestui genotip de virus găsite pe planetă. În Rusia, primul, al doilea și al treilea tip sunt comune. Fiecare dintre genotipuri are o rezistență diferită față de terapie, de exemplu, eficacitatea tratamentului primului tip este de șaizeci la sută, iar pentru a doua și a treia această cifră atinge optzeci și cinci. Prin urmare, pentru a selecta medicamentele adecvate și pentru a prescrie un curs de tratament cu o durată suficientă, este necesar să se determine exact tipul de virus cu care este infectat pacientul.
  • Indicatii pentru analiza PCR pentru hepatita C

    Studiul PCR este prescris în următoarele cazuri:

    • contactul cu o persoană bolnavă la care s-ar putea produce infecția;
    • testul imunologic enzimatic pozitiv;
    • semne de ciroză: modificări ale mărimii ficatului, lărgirea splinei, apariția pe abdomen a plexului venoascular subcutanat;
    • apariția simptomelor de leziuni hepatice: dureri în abdomenul drept, îngălbenirea pielii;
    • creșterea activității ALT și AST în analiza biochimică a sângelui;
    • înainte de începerea tratamentului pentru a determina încărcătura virală;
    • pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antivirale;
    • după tratament pentru a controla recaderea;
    • în prezența hepatitei B diagnosticate, pentru a exclude leziunile hepatice mixte.

    Explicarea studiilor PCR privind hepatita C

    Decodificarea analizei PCR și imunotestei enzimatice pentru hepatita C trebuie efectuată de către un specialist hepatolog sau bolnav infecțios. Analiza rezultatelor PCR este necesară în combinație cu datele analizei biochimice a sângelui, biopsiei și ultrasunetelor. Numai un medic calificat va putea analiza rezultatele cercetării și, pe baza acestora, va prescrie tratamentul corect.

    Analiza calitativă de decodificare.

    În materialul biologic analizat a fost găsit materialul genetic al agentului patogen. Infecția confirmată.

    Infecția lipsește sau cantitatea de ARN a agentului patogen este sub limita de sensibilitate.

    Decodificarea analizei cantitative.

    Rata normală pentru persoanele sănătoase. Aceasta înseamnă că nu există ARN de hepatită C în materialul studiat, sau concentrația sa este sub pragul de sensibilitate al studiului.

    Concentrația ARN este sub intervalul de cuantificare. Aceste rezultate sunt interpretate foarte atent, corelându-le cu date din alte studii, adesea re-studiate.

    Nivelul încărcăturii virale la o concentrație dată este considerat scăzut. De obicei, o scădere a cantității de virus înseamnă că terapia are succes.

    Mai mult de 8 * 10 ^ 5 UI / ml

    Nivelul încărcăturii virale la o anumită concentrație este considerat ridicat.

    Mai mult de 2,4 * 10 ^ 7 UI / ml

    Cantitatea de ARN este peste limita superioară a intervalului de cuantificare. Este imposibil să se tragă concluzii cu privire la gradul de încărcare virală cu acest rezultat. De obicei, în astfel de cazuri, testul se repetă cu diluarea unei probe de sânge.

    Decodificarea genotipării.

    Detectarea ARN a unui anumit genotip

    Virusul hepatitei C cu un anumit genotip și subtip a fost detectat în biomaterial. Rezultatul este codificat în cifre romane și litere latine, de exemplu - 1a, 2b. În total, există șapte genotipuri și șaizeci și șapte subtipuri, cu toate acestea, în Rusia există doar trei primele tipuri.

    Virusul hepatitei C a fost detectat

    ARN sa găsit în sângele unui genotip rar pentru Rusia, care nu poate fi atribuit primului, celui de-al doilea sau celui de-al treilea tip. Sunt necesare mai multe cercetări.

    Acest rezultat indică faptul că pacientul este sănătos sau că cantitatea de ARN patogen este prea mică.

    Este posibil ca analiza PCR pentru hepatita C să fie negativă, iar testul imunosorbant legat de enzimă să recunoască anticorpii împotriva virusului. Aceasta înseamnă că pacientul a avut hepatită C acută și sa recuperat singur. Aproximativ douăzeci de cazuri de infecție au ca rezultat recuperarea spontană dacă corpul pacientului are o rezistență suficientă la infecție.

    Deși PCR este un test foarte precis, rezultatele acestuia pot fi distorsionate în următoarele situații:

    • sângele a fost transportat în laborator în condiții inadecvate, temperatura a fost încălcată;
    • proba de biomaterial a fost contaminată;
    • au existat urme reziduale de heparină și alte anticoagulante în sânge;
    • Investigatorii s-au dovedit a fi inhibitori - substanțe care încetinesc sau opresc reacția în lanț a polimerazei.

    Avantajele PCR față de alte metode

    1. Diagnosticarea în primele etape. PCR detectează materialul genetic al agentului cauzal. Folosind analiza imunofluorescenței se pot determina numai imunoglobuline - substanțe pe care organismul le produce ca răspuns la o infecție. În cazul unei infecții cu hepatită C, intervalul dintre infecție și debutul răspunsului imun pot fi mai multe săptămâni și luni, în acest moment ELISA va fi ineficient. PCR va da un răspuns în prima săptămână după infecție.

  • Scăderea probabilității de eroare. În materialul studiat se determină suprafața materialului genetic, care este caracteristică numai pentru un singur tip de agenți patogeni. Aceasta elimină rezultatele false. Când erorile ELISA sunt posibile, deoarece același tip de anticorpi poate fi eliberat împotriva diferitelor virusuri - astfel de anticorpi sunt numiți anticorpi încrucișați.

  • Sensibilitate ridicată. PCR permite detectarea ARN-ului agentului cauzal chiar și în cantități minime. Acest lucru face posibilă identificarea infecțiilor ascunse.
  • Cum să vă pregătiți pentru donarea de sânge pentru studii PCR

    Pentru analiza PCR a hepatitei C, se colectează sânge venos. De obicei, două porțiuni de sânge sunt luate din vena pacientului la un moment dat: primul este trimis pentru PCR, iar cel de-al doilea prin ELISA. Acest lucru se face pentru a evalua cu mai multă precizie cât de mult este infectat un pacient cu un virus și cum se confruntă cu imunitatea împotriva acestuia.

    De obicei, pacientul trebuie să respecte următoarele reguli:

    • un test de sânge este luat dimineața;
    • Intervalul dintre ultima masă și donarea de sânge trebuie să fie de opt până la zece ore;
    • cu două sau trei zile înainte de analiză, este necesar să se abandoneze alimentele prăjite și grase și alcoolul;
    • timp de douăzeci și patru de ore înainte de analiză, pacientul trebuie să evite efortul fizic: nu purtați greutăți, nu mergeți la sală de gimnastică sau la piscină.

    Articole Hepatita